由烟曲霉产生的一种新的几丁质酶

摘要

本发明得到一株Aspergillus fumigatus YJ－407,分离纯化了新几丁质酶,命名为chiM。它的分子量为46KDa,等电点pH5.6,N－末端氨基酸序列为:A－S－S－G－Y－R－S－V－V－Y－F－V。该酶在pH4.0—7.0的范围内稳定,其中pH为5.0时最稳定;最适反应温度为60℃；Fe²⁺,Zn²⁺,Mn²⁺,Ag⁺,Pb²⁺Hg²⁺强烈抑制酶活。该酶对6—0－羟乙烷基几丁质和脱乙酰几丁质(80%deacylated)的水解能力高于对几丁质粉和胶体几丁质,可将几丁质水解为几丁二糖和几丁三糖,具有外切和内切酶活性,此外,还有显著的转糖基活性,可将几丁二糖转到几丁三糖上形成几丁五糖。该性质可用于生物活性几丁寡糖的酶促制备。

主权项

1.一种从微生物来源分离纯化几丁质酶的方法，其特征在于本发明从微生物资源中获得了一种新的分解几丁质的酶，所采用的微生物属于Aspergillus fumigatus，微生物培养基包含土豆葡萄糖培养基、产几丁质酶发酵培养基，酶的分离纯化包含浓缩、盐析、DEAE柱层析和由聚丙稀酰胺凝胶电泳，也可以用高压液相色谱法进行酶的精制，本发明的几丁质酶不仅有降解几丁质为低聚寡糖的功能，还具有显著的转糖基功能。