生物样品中生物分子的噬菌体检测法

摘要

本发明涉及一种利用丝状噬菌体来检测生物样品中目的分子的存在情况方法。它由一系列根据所用噬菌体特点设计和定义的操作组合而成。这些噬菌体具有展示于衣壳表面的至少一种分子(通常是但不限于是蛋白质),该分子能够与所述生物样品中的至少一个目的分子结合。根据本发明的方法,利用噬菌体衣壳表面展示的分子与噬菌体自身基因组间的联系可以检测是否存在所述分子。衣壳上展示的分子所特有的形成特异复合体的能力确保形成噬菌体—目的分子复合体,后者可以通过扩增噬菌体DNA中的已知序列来进行检测。本发明所述方法非常灵敏,特别适用于诊断和预测。

主权项

1.一种用于检测生物样品中目的分子存在情况的方法，该方法包括一组以下操作：a)将目的分子固定，同时不破坏其与噬菌体表面上展示的分子相互作用的能力；b)使如上固定了的目的分子与至少一种重组丝状噬菌体特异地结合，该噬菌体内含有其序列至少部分已知的单链DNA分子，并在衣壳表面展示有能与存在于生物样品中的至少一个目的分子特异结合的至少一种分子；c)从反应体系中分离以这种方式得到的分子—噬菌体复合体；d)洗涤除去因分子和噬菌体间非特异相互作用产生的复合体；e)加入试剂以便进行以下g)中描述的操作；f)裂解如上挑选出的噬菌体之蛋白衣壳的构成蛋白；g)经聚合酶链反应(PCR)扩增以上所得DNA；h)检测如上扩增的DNA。