从大赖草中提取与穗形相关成分的高活性DNA的方法

摘要

本发明涉及一种从大赖草核酸中高活性与穗形相关成份的确定，首先将大赖草叶片先经液氮研磨，抽提，低速离心进行两相分离，沉淀提出总ＤＮＡ，再经乙醇洗涤后抽干、灭菌，经ＲＮａｓｐ保温后，过Ｓｅｐｈｅｒｏｓｅ－２８柱，分离器ＯＮＡ和ＲＮＡ，再进行纯化处理，经超声波及限制性内切酶酶切成ＤＮＡ片段，通过花粉管通道将其转化到栽培小麦中去，该方法经过多次反复试验证明，小麦穗形均都产生了大穗形变异转化株，经过分子杂交检测，证实穗形小麦是由于大赖草基因转化后产生的结果。

主权项

1、一种从大赖草中提取与穗形相关成分的高活性DNA的方法，其特征在于，首先将大赖草叶片经液氮研磨，用三羟基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)缓冲液及十二烷基磺酸钠抽提，60℃热酚—氯仿处理，低速离心进行两相分离，水相经异丙醇沉淀，提出总DNA，再经70％乙醇洗涤后抽干，溶于灭菌水中，经RNase保温处理后，过Sepherose-2B柱分离总DNA和RNA，收集总DNA。