发明名称 保幼白血球之分类计数方法
摘要 本发明系提供以高精度测定保幼白血球,同时可进行正常白血球之分类及白血球之计数的方法,其中保幼白血球之分类计数方法系由:(1)将保幼白血球保持在生存状态,以对其他白血球赋与损伤之溶血剂处理,作为血液学上的试料;(2)以可对已受损之细胞染色的萤光色素对已损伤之前述白血球染色,(3)测定经上述步骤处理的血球之至少一个散射光及至少一个萤光,由其强度差分类计数白血球而成者。
申请公布号 TW375681 申请公布日期 1999.12.01
申请号 TW086116699 申请日期 1997.11.08
申请人 西斯美股份有限公司 发明人 田孝;水上利洋;祽中加代
分类号 G01N33/50;G01N1/30;G01N33/52 主分类号 G01N33/50
代理机构 代理人 陈灿晖
主权项 1.一种保幼白血球之分类计数方法,系包括下列步 骤: (1)将保幼白血球维持在生存状态,以可使其他白血 球损伤之溶血剂处理血液学上的试料; (2)以可对已受损之细胞染色的萤光色素对已损伤 之前述白血球染色; (3)测定经上述步骤处理的血球之至少一个散射光 及至少一个萤光,由其强度差分类计数白血球。2. 如申请专利范围第1项之方法,系在分类计数保幼 白血球时,同时亦可侦测出正常白血球并计数出全 部白血球数。3.如申请专利范围第2项之方法,系再 将正常白血球分类成至少三种并予计数。4.如申 请专利范围第1项至第3项之任一项之方法,其中溶 血剂系包含有下列成分者: (1)供固定化保幼白血球之细胞质及细胞膜而用的 聚氧化乙烯系非离子界面活性剂; (2)使血球之细胞膜受损并缩小化之可溶化剂; (3)使保幼白血球之细胞质及细胞膜固定化之胺基 酸;及 (4)可将检液之pH调成5.0-9.0,渗透压调成150-600 mOsm/kg 之缓冲液。5.如申请专利范围第1项至第3项之任一 项之方法,其中萤光色素系选自以下的组群者: (1)下式(I)所示之化合物: (式中,R1为氢原子或C1-6烷基;R2及R3为氢原子、C1-6 烷基或C1-6烷氧基;R4为氢原子、C2-3醯基或C1-6烷基; R5为氢原子、可被羟基或卤原子取代的C1-6烷基;Z 为被硫原子、氧原子或C1-6烷基所取代之碳原子;n 为1或2;X-为阴离子); (2)溴化乙锭、碘化丙锭; (3)乙锭-啶杂二元体、乙锭二叠氮、乙锭均二元 体-1.乙锭均二元体-2.乙锭单叠氮、TOT0-1.TO-PRO-1. TOTO-3.TO-PRO-3。图式简单说明: 第一图为本发明之方法中可使用的细胞流动计之 概略图。 第二图表示采用本发明之方法测定的结果。A示正 常血液之测定结果,B示有保幼颗粒球出现之血液,C 示有保幼颗粒球、芽球出现之检体的测定结果。 第三图表示对依据本发明之测定法的测定结果及 由习用方法的测定结果比较而得的相关分析结果 。 第四图表示采用本发明之方法测定投于G-CSF后出 现造血前驱细胞的检体之测定结果。 第五图表示分离CD34阳性之造血前驱细胞后,采用 本发明之方法测定的结果。
地址 日本