一种蚓激酶制备工艺

摘要

本发明公开了一种蚓激酶制备工艺,将蚯蚓经生理盐水处理,采用匀浆、冻融法制备蚯蚓粗提物,然后通过超滤、亲和层析、离子交换及分子筛等技术组合,从蚯蚓中提取纯化三种有纤溶活性的蚓激酶,其分子量分别为3.0±0.2万、2.5±0.2万及2.2±0.2万的三种蛋白质,其纯度分别达到SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS－PAGE)显示一条带,高效液相色谱(HPLC)呈现一个峰的水平,其纤溶活性均为每mg含相当于尿激酶活性1000单位以上。体外溶血栓试验证明有良好的直接溶栓作用;动物体内试验证明,其体内溶血栓活性优于尿激酶。

主权项

1、一种蚓激酶制备工艺，包括以下工艺制备：将蚯蚓用清水洗净泥土，加入生理盐水冲洗处理，按(V/V)1∶3～5的比例加入0.2MpH4.6～4.8的柠檬酸钠制成匀浆，经1000～4000rpm离心20～40分钟，取上清液，通过超滤法去除大分子蛋白，滤液用亲和层析法初步纯化，收集活性组分，再通过离子交换柱进一步纯化，取其活性组分，再经分子筛层析，分段收集各个活性组分，取分子量为3.0±0.2万、2.5±0.2万及2.2±0.2万的三种活性蛋白质。