| 主权项 |
1.一种检测一肺癌病患有发展为肿瘤侵入(invasion) 或转移(metastasis)之危险性的方法,其包括: 提供一肺癌病患所取得之样品; 测定该样品中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor)之表现量; 其中该肺癌为非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma, NSCLS)且当该样品中之结缔组织生长因子 表现量低于正常个体取得之样品的测定量,代表该 病患有发展为肿瘤侵入性与转移性之危险性。 2.如申请专利范围第1项所述之检测一肺癌病患有 发展为肿瘤侵入或转移之危险性的方法,其中该样 品为非小细胞肺癌组织样品。 3.如申请专利范围第1项所述之检测一肺癌病患有 发展为肿瘤侵入或转移之危险性的方法,其中该肺 癌系腺癌、麟状细胞癌、或大细胞癌。 4.如申请专利范围第1项所述之检测一肺癌病患有 发展为肿瘤侵入或转移之危险性的方法,其中该肺 癌系肺腺癌。 5.一种用以治疗或预防肺癌之侵入或转移的药学 组合物,其包括一有效量之编码结缔组织生长因子 之核酸,以及一药学上可接受载体,且其中该肺癌 为非小细胞肺癌。 6.如申请专利范围第5项所述之用以治疗或预防肺 癌之侵入或转移的药学组合物,其中该药学组合物 系作用于肺脏组织。 7.如申请专利范围第5项所述之用以治疗或预防肺 癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系腺癌 、麟状细胞癌、或大细胞癌。 8.如申请专利范围第5项所述之用以治疗或预防肺 癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系肺腺 癌。 9.一种用以治疗或预防肺癌之侵入或转移的药学 组合物,其包括一有效量之结缔组织生长因子,以 及一药学上可接受载体,且其中该肺癌为非小细胞 肺癌。 10.如申请专利范围第9项所述之用以治疗或预防肺 癌之侵入或转移的药学组合物,其中该药学组合物 系作用于肺脏组织。 11.如申请专利范围第9项所述之用以治疗或预防肺 癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系腺癌 、麟状细胞癌、或大细胞癌。 12.如申请专利范围第9项所述之用以治疗或预防肺 癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系肺腺 癌。 13.一种用以治疗或预防肺癌之侵入或转移的药学 组合物,其包括一有效量之编码结缔组织生长因子 之CT单元之核酸,以及一药学上可接受载体,且其中 该肺癌为非小细胞肺癌。 14.如申请专利范围第13项所述之用以治疗或预防 肺癌之侵入或转移的药学组合物,其中该药学组合 物系作用于肺脏组织。 15.如申请专利范围第13项所述之用以治疗或预防 肺癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系腺 癌、麟状细胞癌、或大细胞癌。 16.如申请专利范围第13项所述之用以治疗或预防 肺癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系肺 腺癌。 17.一种用以治疗或预防肺癌之侵入或转移的药学 组合物,其包括一有效量之结缔组织生长因子之CT 单元,以及一药学上可接受载体,且其中该肺癌为 非小细胞肺癌。 18.如申请专利范围第17项所述之用以治疗或预防 肺癌之侵入或转移的药学组合物,其中该药学组合 物系作用于肺脏组织。 19.如申请专利范围第17项所述之用以治疗或预防 肺癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系腺 癌、麟状细胞癌、或大细胞癌。 20.如申请专利范围第17项所述之用以治疗或预防 肺癌之侵入或转移的药学组合物,其中该肺癌系肺 腺癌。 21.一种筛选用以治疗或预防肺癌之侵入或转移之 化合物的方法,其包括: 使一化合物与表现结缔组织生长因子之细胞接触; 以及 测定结缔组织生长因子在该细胞之表现量; 其中当测定量高于未受该化合物处理之细胞的测 定量,代表该化合物具有治疗或预防肺癌之侵入或 转移之潜力,且其中该肺癌为非小细胞肺癌。 22.如申请专利范围第21项所述之筛选用以治疗或 预防肺癌之侵入或转移之化合物的方法,其中该细 胞为肺脏组织。 23.如申请专利范围第21项所述之筛选用以治疗或 预防肺癌之侵入或转移之化合物的方法,其中该肺 癌系腺癌、麟状细胞癌、或大细胞癌。 24.如申请专利范围第21项所述之筛选用以治疗或 预防肺癌之侵入或转移之化合物的方法,其中该肺 癌系肺腺癌。 图式简单说明: 第1A图为在CL1-0及其支系(CL1-3及CL1-5)中结缔组织生 长因子之表现情形与体外侵入性试验结果。第1A 图之上左方为CTGF、Cyr61、以及作为内源性对照组 之-肌动蛋白之西方墨点分析结果;第1A图之上右 方为CTGF、Cyr61、以及作为内源性对照组之-肌动 蛋白之RT-PCR分析结果;第1A图之下方为每一细胞株 之48小时后体外包氏小室侵入性试验结果。每一 细胞株都进行三次重复试验分析;结果系以收集细 胞之平均数目 SE表示。 第1B图为在人类肺腺癌细胞株(H928、NICH520、及A549) 中结缔组织生长因子表现情形与体外侵入性试验 结果。第1B图之上方为CTGF、及Cyr61之西方墨点分 析结果;第1B图之下方为体外侵入性试验结果。每 一实验都进行四次重复试验分析;结果系以平均値 表示,误差距代表上95%信赖区间。 第2A~2D图显示人类肺腺癌细胞中之侵入性与结缔 组织生长因子大量表现之关系。第2A图显示伪转 染(CL1-5/neo)与CTGF转染(CL1-5/CTGF-M, CTGF-3, CTGF-10)之CL1 -5细胞种株之CTGF及作为内源性对照之-肌动蛋白 的表现程度。呈现之结果系经neo对照株标准化。 第2B图显示伪转染(CL1-5/neo)与CTGF转染(CL1-5/CTGF-M, CTGF-3, CTGF-10)之CL1-5细胞种株之体外侵入性试验结 果。第2C图显示A549细胞中大量表现结缔组织生长 因子对于侵入性之影响。第2C图上方为在伪转染 之A549细胞(A549/neo)以及大量表现结缔组织生长因 子之混合A549细胞(A549/CTGF-M)、单离A549细胞株(A549/ CTGF-4及A549/CTGF-5)中CTGF以及作为内源性对照组之 -微管蛋白之西方墨点分析结果。第2C图之下方为A 549细胞株体外侵入性试验结果。数値系经A549/neo 株之结果标准化。结果系以三次独立实验之平均 SE表示;误差棒代表上95%信赖区间。第2D图系显示 大量表现结缔组织生长因子对CL1-5细胞生长特性 的影响。结果系以平均値 SE表示。每一实验都进 行三次独立重复试验分析。 第3A~3B图显示人类肺腺癌细胞转移受结缔组织生 长因子之抑制。第3A图显示分别注射106个载体-(CL1 -5/neo及A549/neo)或CTGF-转染肿瘤细胞(CL1-5/CTGF-M及A549 /CTGF-M)之SCID小鼠在注射后2个月时所取得肺脏之照 相结果。白箭头指出转移之肿瘤结节。第3B图显 示CL1-5/neo与CL1-5/CTGF-M肺转移之组织学分析。放大 倍率:40。 第4A~4C图显示转染结缔组织生长因子之细胞中CRMP- 1蛋白受到向上调节之情形。第4A图上方显示人类 肺腺癌细胞稳定转染顺向或反向CTGF表现载体与对 照载体之CRMP-1蛋白质表现情形;第4A图下方显示整 合素 3与 5对于CTGF诱发CRMP-1蛋白增 加系必要的。第4B图显示在暂时转染载体(vector)与 CTGF(CTGF 0.3g、0.5g、1g、3g)之CL1-5细胞中 CTGF、CRMP-1、及作为内源性对照组之-微管蛋白 表现的西方墨点分析。第4C图显示CRMP-1之反向寡 核酸会增加CL1-5/CTGF细胞之侵入性。第4C图上方 为CRMP-1之反向寡核酸处理过之细胞中CRMP-1及作 为内源性对照组之-微管蛋白表现的西方墨点分 析。第4C图下方为CRMP-1之反向寡核酸处理过、 大量表现CRMP-1之CL1-5细胞的侵入性分析。S-oligo代 表CRMP-1顺向寡核酸;AS-oligo代表CRMP-1反向寡核 酸。 第5A~5D图显示肺癌病患之结缔组织生长因子表现 的免疫组织化学分析。第5A图显示正常上皮代表 染色,黑箭头指出上皮细胞,放大倍率400。第5B图 经过第一次手术切除之肺腺癌病患代表切片(第I 期),放大倍率200。第5C图显示转移至脑部之肺癌 病患的代表切片(第VI期),放大倍率200。第5D图显 示癌化区域之CTGF染色为阴性,但四周之基质细胞 显示染色第2-3级强度(黑箭头),放大倍率200。比例 尺显示100m。 第6A~6B图显示依照结缔组织生长因子表现分群之 肺腺癌病患的Kaplan-Meier存活曲线。第6A图显示结 缔组织生长因子表现与无病率相关。第6B图显示 结缔组织生长因子表现与总存活率相关。实线代 表结缔组织生长因子高表现之病患(第3及2级强度) ;虚线代表结缔组织生长因子表现减少或无表现之 病患(第1及0级强度)。 |
