从合成的RNA转录物制备双RNA病毒的方法

摘要

利用起源于克隆的DNA的合成转录物已经开发了制备活的双RNA病毒如感染性的囊病病毒(IBDV),一种双RNA病毒家族的形成区段的双链(ds)RNA病毒的系统。构建了独立的全长cDNA克隆,它们分别含有IBDV的RNAA和B区段的整个编码和非编码区。利用T7RNA聚合酶对线性化质粒体外转录产生两个区段的合成RNA。利用合并的两区段的正意义转录物转染非洲绿猴肾细胞,在早至转染后36小时产生感染性病毒。dsRNA病毒的反遗传系统的开发将大大简化病毒基因表达的调节和病理的研究和产生新的活和失活疫苗的设计。

主权项

1.用于制备活的双RNA病毒的方法，包括下列步骤：制备含有感染性囊病病毒基因组区段A和B的cDNA，将所述的cDNA转录以产生合成的RNA转录物，用所述的合成的RNA转录物转染宿主细胞，在培养基中培养所述的宿主细胞，和从所述的培养基中分离活的感染性囊病病毒。