质粒DNA快速提取试剂盒及其应用方法

摘要

本发明涉及分子生物学研究领域,为一种简易快速提取质粒DNA的试剂盒及其应用方法。本试剂盒包括菌体重悬缓冲液、菌体裂解缓冲液、质粒沉淀缓冲液、异丙醇、蛋白沉淀缓冲液和DNA稀释液六种试剂。本发明与国内外相关的试剂盒相比,具有快速、简易、高效、高质、价廉和无害的优点,提取的质粒DNA(1A、2A、3A)与应用Qiagen柱式纯化试剂盒提取的相应质粒DNA(1B、2B、3B)的电泳图谱比较,电泳条带同样清晰,无RNA混杂。

主权项

1．一种提取质粒DNA的试剂盒，其特征在于包括菌体重悬缓冲液(R1)、菌体裂解缓冲液(R2)、质粒沉淀缓冲液(R3)、异丙醇(R4)、蛋白沉淀缓冲液(R5)和DNA稀释液(R6)六种试剂，R1的组分为50mmol葡萄糖，25mmol Tris-Hcl(pH8.0),10mmol EDTA(pH8.0),5mg/ml溶菌酶；R2的组分为0.2mol NaOH,1％SDS；R3的组分为5.0～6.0mol醋酸铵(或醋酸钠)，pH7.4～7.6；R4为分析纯的异丙醇；R5的组分为1.2～1.6mol醋酸铵(或醋酸钠)，pH7.2～7.3；R6的组分为TE缓冲液中加入终浓度为0.1mg/ml RNase A和100单位/mlRNase T。