一种从天麻中提取的抗真菌蛋白及其制备方法

摘要

利用生物技术的方法,主要是液相色谱技术及蛋白质结构分析技术,天麻中分离纯化出一种抗真菌的蛋白质名为GAFP－1,其分子量为10kD,等电点为8.45。从氨基酸组成上看,它富含天门冬氨酸(酰胺)Asx(22.1%)、甘氨酸Gly(10.0%)、亮氨酸Leu(9.4%),只含一个Met，不含Pro。GAFP－1的N端氨基酸序列为SDRLNSGHQLDTGGSLAQGGYLFI。根据这个序列可以合成DNA探针或引物,可克隆出GAFP－1基因,为获得转基因抗真菌农作物打下了物质基础。

主权项

1、一种天麻抗真菌蛋白质GAFP-1及其制备方法，其特征在于氨基酸的 组成为： 摩尔百分比 氨基酸残基数 天门冬氨酸(酰胺)，Asx 苏氨酸，Thr 丝氨酸，Ser 谷氨酸(酰胺)，Glx 脯氨酸，Pro 甘氨酸，Gly 丙氨酸，Ala 缬氨酸，Val 蛋氨酸，Met 异亮氨酸，Ile 亮氨酸，Leu 酪氨酸，Tyr 苯丙氨酸，Phe 赖氨酸，Lys 组氨酸，His 精氨酸，Arg 色氨酸，Trp 半胱氨酸，Cys 22.1 4.4 7.4 6.0 0 10.0 7.5 4.7 1.3 5.2 9.4 4.5 1.9 1.7 7.4 5.5 1.08(4.0) 20 4 7 6 0 9 7 4 1 5 9 4 2 2 7 5 3^*1(4)^** 99.99 96(99) ^*色氨酸残基数通过与酪氨酸比较消光值(A288,A280)而测得。 ^**经巯基保护后测得半胱氨酸的残基数为4。 其分子量为10kD；等电点pI=8.45的碱性蛋白；在含2M硫酸铵的溶液 中能结合甘露糖，几丁质，N乙酰葡萄糖胺；其N端氨基酸序列为： SDRLNSGHQLDTGGSLAQGGYLFI