利用合成基因在酵母菌中生产草鱼生长激素的方法

摘要

根据天然草鱼生长激素多肽的氨基酸顺序,设计了适合其在酵母表达的DNA编码顺序,采用PCR技术完成了草鱼生长激素基因人工合成。在此基础上,将此基因克隆在酵母基因表达系统,使之与酵母染色质DNA整合,并筛选高基因拷贝和高表达的酵母株。该菌株表达的草鱼生长激素占酵母细胞总蛋白的12%,经氨基酸顺序分析表明酵母所生产的草鱼生长激素多肽与天然多肽相同,该基因表达水平持续稳定,可应用于渔业和提高水产养殖效益。

主权项

1、一种利用合成基因在酵母菌中生产草鱼生长激素的方法，其特征是：A、16个寡聚脱氧核糖核酸的顺序，其中8个为正向顺序，另8个为“搭桥”反向顺序，该基因5’端和3’端分别附有EcoR1酶切位点；B、人工合成的草鱼生长激素基因克隆在表达载体pGAPZA中，构成重组质粒pGGH DNA；C、用电脉冲方法将pGGH DNA导入酵母宿主细胞并使之与染色质整合；D、筛选高拷贝整合和高表达的酵母菌转化株。