发明名称 核酸之放大及新颖G型肝炎病毒(HGV)之侦测
摘要 本发明使用一种试剂实施RT-PCR,其可对G型肝炎病毒(HGV)的侦测提供特别值得信赖的结果。
申请公布号 TW350876 申请公布日期 1999.01.21
申请号 TW085114275 申请日期 1996.11.20
申请人 宝铃嘉漫汉公司 发明人 披他斯.奥芬兰–哈诺
分类号 C12Q1/70 主分类号 C12Q1/70
代理机构 代理人 林志刚 台北巿南京东路二段一二五号七楼
主权项 1.一种可放大G型肝炎病毒(HGV)-特异性核酸序列的试剂,其中HGV定义为一种病毒其基因组系由RNA组成,在其5'端的核酸序列至少80%与SEQ ID NO.1相同,试剂含有二个HGV-特异引子,每一个引子都有一可延伸端,其中一个引子含有15-30个硷基,该序列与SEQ ID NO.1的接续硷基互补程度大于80%;另一个引子含有15-30个硷基,其序列与SEQ ID NO.1的接续硷基相同程度大于80%。其中引子的可延伸端是经过选择的,因此引子是可延伸的,每一引子可与另一引子延伸产物杂交,并且个别延伸产物可做为另一引子延伸作用时的模板,其中至少一个引子含有如SEQ ID NO.2.3.5.6.7.8或9的序列。2.如申请专利范围第1项的试剂,其特征为至少一个引子含有如申请专利范围第1项所述之SEQ ID NO.1序列的六个连续硷基序列或其互补序列。3.如申请专利范围第1项的试剂,其特征为至少一个引子是被标识而可侦测。4.一种专一性侦测HGV的试剂套组,其组成为如申请专利范围第1-3项任一项的试剂和含有位于所形成的延伸产物的引子可延伸端之间的硷基序列的探针。5.如申请专利范围第4项的试剂套组,其特征为硷基序列含有至少六个如申请专利范围第1项所述之SEQ ID NO.2.3.5.6.7.8或9序列或如下所示之SEQ ID NO.4序列的连续硷基或其互补序列。6.一种专一性侦测HGV的试剂套组,其组成为如申请专利范围第1-3项任一项的试剂和可放大HGV核酸序列的额外引子所构成的另一试剂。7.如申请专利范围第6项的试剂套组,其含有每一对引子和侦测延伸产物所需的一个探针。8.一种侦测HGV样品的方法,其特征为从部分的HGV-RNA形成cDNA并利用如申请专利范围第1-3项任一项试剂的引子延伸作用将cDNA放大,当形成放大产物,将放大产物与含位于引子可延伸端之间硷基序列的探针接触,并观察探针和放大产物之间所形成的杂交物以显示样品内HGV的存在。9.一种侦测样品中HGV的方法,其特征为-从二或更多部分的HGV-RNA形成cDNA,使用如申请专利范围第1-3项任一项的试剂和额外的HGV-特异引子对将cDNA放大,-将每一部分的放大产物与探针接触,-观察探针和放大产物之间所形成的杂交物和,-估计探针和放大产物之间所形成的杂交物,其中一个放大产物杂交物确认样品中存在HGV。
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