无保护剂双重病毒灭活制备静注免疫球蛋白工艺

摘要

本发明涉及生物制品的制备方法。本工艺中不加任何保护剂,采用巴氏灭活与低pH孵放处理相结合的双重病毒灭活方法,不但能有效杀灭病毒,保持免疫球蛋白分子的完整性和天然生物活性以及制品的纯洁性和安全性,在工艺中选择了制备免疫球蛋白液体剂型而不是冻干制剂,有利于大规模生产,其产品质量稳定而可靠。在本制品中加入5%葡萄糖以维持其溶液的等渗度,避免了一些患者在使用中出现的不良反应。

主权项

1.一种无保护剂双重病毒灭活制备静注免疫球蛋白工艺，其特征在于：第一步巴氏灭活：以Cohn’s组分II(FII)为原料用2～10倍的冰蒸馏水溶解，调节pH3.5～5.0，用0.2～2.0mmol/L醋酸，分子量10～100kDa(道尔顿)超滤膜超滤脱醇、脱盐至电阻率≥5kΩ·cm(NaCl＜2mmol/L)，调节免疫球蛋白浓度＜2％，装瓶，充CO2使内压＞700Pa，在无任何保护剂条件下封口。60±1℃，10小时灭活。第二步低pH孵放处理：经巴氏灭活的FII溶液用10～100kDa超滤膜切割精制，如果免疫球蛋白纯度仍＜97％时，可用DEAE-Sephadx A-50凝胶吸附提高纯度，然后浓缩至免疫球蛋白浓度≥5％，调pH4.1±0.3，除菌过滤，室温放置21天，加入5％葡萄糖调节渗透压，除菌后进行半成品理化检查和生物学试验。半成品检测合格后，除菌过滤，分装25ml/瓶或50ml/瓶，按静脉注射用人血免疫球蛋白规程进行全面质量检查。