METHOD FOR OPTICAL DETECTION OF ANALYTE MOLECULES IN A NATURAL BIOLOGICAL MEDIUM

摘要

Zur optischen Detektion und Identifizierung einzelner Tumormarker in unverdünntem Blutplasma werden die Tumormarker mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert, die sich durch spezifische Fluoreszenzlebensdauern im Bereich von 0.5 bis 6 ns auszeichnen. Das Blutplasma wird durch einen gepulsten Diodenlaser bestrahlt, der im Wellenlängenbereich zwischen 630 und 670 nm emittiert. Die Emissionswellenlänge der Farbstoffe wird 10 bis 60 nm länger als die Wellenlänge des Diodenlasers gewählt. Mit Hilfe von zeitkorreliertem Einzelphotonen-Zählen werden Abklingkurven des Blutplasmas aufgenommen. Diese werden durch ein biexponentielles Modell beschrieben, bei dem eine feste Fluoreszenzlebensdauer von 300 ps für die Emission des Blutplasmas und eine variable Fluoreszenzlebensdauer für die markierten Tumormarker angenommen wird. Der relative Anteil der Fluoreszenzphotonen der markierten Tumormarker an den insgesamt detektierten Photonen wird bestimmt. Überschreitet er einen Wert von 0,3, ist ein Tumormarker im Beobachtungsvolumen vorhanden. Ferner können die Tumormarker über die in der biexponentiellen Auswertung bestimmten Lebensdauern identifiziert werden. Somit können einzelne Tumormarker in unverdünntem Blutplasma detektiert und identifiziert werden.