除垢剂酶活性的噬菌体显示

摘要

本文涉及鉴定适合用于除垢剂中的酶的方法,尤其是在通过随机诱变创造的大量变体中选择特异性的酶变体的方法。这种方法包括将要选择的酶变体在各自显示于噬菌体微粒细胞表面上的酶变体混合物中;和(i)在将对酶活性有负面影响或使大多数所说的酶变体失活的条件下把混合物引入到除垢剂组合物中;(ii)使所说的混合物与将特异性地结合到表现所需特性的酶变体的捕集器分子进行反应;(iii)从所说的混合物的余下部分分离所说的复合物;(iv)解离所说的复合物以便分离出显示所说的酶变体(没有捕集器分子)的细胞或噬菌体;(v)把所说的噬菌体引入到它能够繁殖的宿主中;或者(va)在有助于其繁殖的条件下培养所说的细胞;(vi)从所说的细胞或者噬菌体的基因组中分离编码所说的酶变体的DNA分子;和(vii)确定所说的DNA分子的序列。本发明还描述了用于所说的方法的特异性的材料、通过使用所说的方法选择的酶以及包含所说的酶的除垢剂组合物。

主权项

1.一种选择适合于在除垢剂中使用的酶或者酶变体的方法，其中所说的将要选择的酶变体在各自显示于噬菌体微粒细胞表面上的酶变体混合物中，这种方法包括下列步骤：i)在将对酶活性有负面影响或使大多数所说的酶变体失活的条件下以液体形式将所说的混合物引入到除垢剂组合物中；ii)使所说的混合物与将特异性地结合到表现所需特性的酶变体的捕集器分子进行反应，以在表现出所需特性的酶变体的所说的细胞或者噬菌体和所说的捕集器之间显示形成复合物；(iii)从所说的混合物的余下部分分离所说的复合物；(iv)解离所说的复合物以便分离出显示在没有捕集器分子时所要选择的所说的酶变体的细胞或噬菌体；(v)把所说的噬菌体引入到它能够繁殖的宿主中；或者(va)在有助于其繁殖的条件下培养所说的细胞；和(vi)从所说的细胞或者噬菌体的基因组中分离编码所说的酶变体的DNA分子。