编码可提高耐热性的脱氨基甲酰酶的DNA及其用途

摘要

公开了由于编码来自微生物的脱氨基甲酰酶蛋白的ＤＮＡ片段的至少１个碱基用其他的碱基置换后，对应的氨基酸的至少１个被置换，而编码耐热性提高了的脱氨基甲酰酶蛋白的ＤＮＡ片段、其制备方法、含有该ＤＮＡ片段的载体、用该载体转化了的转化体、以及耐热性提高了的脱氨基甲酰酶及其制备方法。另外，也公开了由于耐热温度６５℃以上的脱氨基甲酰酶的作用，在水性溶剂中，把Ｎ－氨基甲酰－Ｄ－α－氨基酸转化成对应的Ｄ－α－氨基酸，获取生成的Ｄ－α－氨基酸的Ｄ－α－氨基酸的制备方法。

主权项

1.编码耐热性提高了的脱氨基甲酰酶蛋白的DNA片段的制备方法，其特征是用选自盐酸羟胺、亚硝酸钠、甲酸、肼和亚硝基胍的诱变剂，用紫外照射或经聚合酶链反应(PCR)使编码能除去N-氨基甲酰-D-α-氨基酸的氨基甲酰基将其转变为相应D-α-氨基酸的酶即脱氨基甲酰酶蛋白的DNA片段随机突变，或用PCR进行位点特异性突变，所述酶来自选自下组的微生物。土壤杆菌种KNK712(FERM BP-1900)、大肠杆菌E·Coli JM109pAD402(CCTCC No.M93038)，E·Coli JM109 pAD404(CCTCCNo.M93039)，E·Coli JM109 pAD406(FERM BP-3914)，E·ColiJM 109 pAD416(CCTCC No.M 93040)，E·Coli JM109pAD428，E·Coli JM 109 pAD429(FERM BP-4035)，E·ColiJM109 pAD431，E·Coli JM109 pAD434，E·Coli JM109pAD435，E·Coli JM109 pAD439，E.Coli JM109 pAD441，E.ColiJM109 pAD445，E·Coli JM109 pAD447，E·Coli JM109pAD448，E·Coli JM109 pAD450，E·Coli JM109 pAD421，E·Coli JM109 pAD422，E·Coli JM109 pAD423，E·ColiJM109 AD424(CCTCCNo.M93041)，E·Coli JM109 pAD425，E·Coli JM109 pAD426，E·Coli JM109 pAD427，E·ColiJM109 pAD451，E·Coli JM109 pAD452，E·Coli JM109pAD453，E.Coli JM109 pAD461，E·Coli JM109 pAD454，E·Coli JM109 pAD455(FERM BP-4036)，E·Coli JM109pAD456，E.Coli JM109 pAD468，E·Colli JM109 pAD469，E·Coli JM109 pAD470和E·Coli HB101 pNT4553(CCTCC No.M93042)。