REACCIONES DE SINTESIS DE DNA (IN VITRO) QUE EMPLEAN DNA POLIMERASA DE PHI 29 MODIFICADA Y UN FRAGMENTO DE DNA QUE CODIFICA DICHA POLIMERASA.

摘要

UN METODO MEJORADO PARA DETERMINAR LA SECUENCIA DE BASE NUCLEOTIDA DE UNA MOLECULA DE ADN. EL METODO INCLUYE EL FORTALECIMIENTO DE LA MOLECULA DE ADN CON UNA MOLECULA DE IMPRIMACION CAPAZ DE HIBRIDIZAR EN LA MOLECULA DE ADN; LA INCUBACION DE LA MEZCLA FORTALECIDA EN UN RECIPIENTE QUE CONTIENE CUATRO TRIFOSFATOS DEOXINUCLEOSIDOS DISTINTOS, UNA POLIMERASA DE ADN Y UNO O MAS AGENTES DE TERMINACION DE SINTESIS DE ADN QUE TERMINAN LA SINTESIS DE ADN EN UNA BASE NUCLEOTIDA ESPECIFICA, EN DONDE CADA UNO DE LOS AGENTES TERMINA LA SINTESIS DE ADN EN UNA BASE NUCLEOTIDA DISTINTA; Y LA SEPARACION DE LOS PRODUCTOS DE ADN DE LA REACCION DE INCUBACION SEGUN EL TAMAÑO, SE PUEDE DETERMINAR DE ESTE MODO, AL MENOS, UNA PARTE DE LA SECUENCIA DE BASE NUCLEOTIDA DE ADN. LA MEJORA ESTA CONSTITUIDA POR EL SUMINISTRO DE UNA POLIMERASA DE ADN QUE ES UNA POLIMERASA DE ADN TIPO PHI29.