PROCEDIMIENTO DE PURIFICACION DE CISTEINO PROTEINASAS FAS1 Y FAS2 DEL PARASITO FASCIOLA HEPATICA Y USO DE ELLAS EN LA DETECCION DE FASCIOLASIS HUMANA Y ANIMAL

摘要

SE REFIERE AL PROCEDIMIENTO PARA PURIFICAR LOS ANTIGENOS FAS1 Y FAS2 QUE COMPRENDE: a) OBTENCION DE LOS PRODUCTOS DE EXCRECION-SECRECION DEL PARASITO ADULTO DE FASCIOLA HEPATICA POR SHOCK HIPOOSMOTICO EN AGUA DESTILADA A 4�C; b) LIOFILIZACION Y DILUCION EN UNA SOLUCION TAMPONADA TAL COMO EL BUFFER CITRATO DE SODIO 0,2 M A pH 5, QUE CONTIENE 0,1mM DE CLORURO DE MERCURIO; c) FRACCIONAMIENTO ETANOLICO, POR EL QUE SE OBTIENE EL SOBRENADANTE Y EL PRECIPITADO; d) PROCESO DE DIALISIS DEL SOBRENADANTE UTILIZANDO MEMBRANA DE DIALISIS, DE PORO DE RESOLUCION DE 12 000D A 14 000D; e) FRACCIONAMIENTO DE LAS PROTEINAS POR CROMATOGRAFIA SOBRE UNA MATRIZ DE CARBOXI-METIL SEPHADEX C-50 EQUILIBRADA CON SOLUCION TAMPONADA; f) DIALISIS DE LAS FRACCIONES PROTEICAS PARA ELIMINAR LAS SALES PRESENTES, Y FINALMENTE LIOFILIZACION DE LAS FRACCIONES. ESTOS ANTIGENOS PURIFICADOS SON MARCADORES POTENCIALES Y SON UTILIZADOS PARA EL DIAGNOSTICO DE FASCIOLASIS