在硫代磷酸酯化引物存在下用核酸外切酶进行聚合酶链反应扩增前消毒的方法

摘要

本发明提供了PCR扩增靶核酸的混合物和方法，其中用含有硫化磷酸酯化寡聚核苷酸引物和一种核酸外切酶的PCR反应混合物增加扩增效率。本发明还提供了扩增靶核酸的药盒。

主权项

1.一种扩增靶核酸的方法，它包括：(a)把怀疑含有该靶核酸的样品与(i)至少两种寡聚核苷酸引物，它们足以与杂交到其上的杂交靶核酸区域互补，其中各个寡聚核苷酸引物至少含有一个硫化磷酸酯键，(ii)至少四种不同的三磷酸核苷，(iii)一种热稳定性聚合剂，以及(iv)至少一种3′核酸外切酶接触来形成一种反应混合物；(b)把该反应混合物加热使该核酸外切酶失活；以及(c)形成引物扩大产物。