摘要 |
HA SIDO DESCUBIERTO QUE CUALQUIER RNA PUEDE SER TERMINADO POR DESDOBLAMIENTO DE RNAASA P A PARTIR DE CELULAS EUCARIOTICAS, POR EJEMPLO, CELULAS HELA HUMANAS, USANDO UN OLIGORIBONUCLEOTIDO ADECUADAMENTE DISEÑADO ("SECUENCIA DE GUIA EXTERNA, O EGS) PARA FORMAR UN HIBRIDO CON EL RNA DE DESTINO, POR LO QUE SE CREA UN SUSTRATO PARA DESDOBLAMIENTO POR RNAASA P IN VITRO. HAY DOS CLASES DE EGS QUE PUEDEN TERMINAR RNA POR DESDOBLAMIENTO POR RNAASA HUMANO. ESTAS SE PREPARAN POR TRANSCRIPCION DE UN PEQUEÑO FRAGMENTO DE DNA QUE CONTIENE UNA SECUENCIA QUE CODIFICA UN RNA QUE PUEDE ASUMIR UNA ESTRUCTURA SECUNDARIA TIPO TRNA. EN LAS PRIMERAS CLASES, LA ESTRUCTURA CARECE AL MENOS DE LOS PRIMEROS TRECE NUCLEOTIDOS DESDE EL TERMINO 5'' DE LA SECUENCIA TIPO TRNA, LOS TALLOS Y LAZOS ANTICODON, EL BUCLE VARIABLE O PARTE DEL BUCLE VARIABLE. LA EGS MAS EFICIENTE CON RNAASA P HUMANA ES EL EGS EN EL QUE EL TALLO Y BUCLE ANTICODON HAN SIDO BORRADOS. EN LA SEGUNDA CLASE, EL EGS TIENE CAMBIOS EN AMBOS EL EQUIVALENTE DEL BUCLE T Y EL TALLO ANTICODON DEL SEGMENTO TIPO TRNA DEL EGS. TAMBIEN SE DESCRIBEN METODOS PARA SELECCIONAR ALEATORIAMENTE Y PARA EXPRESAR UN EGS ADECUADO, EN VIVO, PARA HACER UNA OBTENCION DE RNA SELECCIONADO POR DESDOBLAMIENTO DE LA CELULA ANFITRION RNAASA P, EVITANDO ASI LA EXPRESION DE LA FUNCION DEL RNA DE OBJETIVO. LOS METODOS Y COMPOSICIONES DEBEN SER USADOS PARA PREVENIR LA EXPRESION DE GENES QUE CAUSEN ENFERMEDAD EN VIVO.
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