发明名称 |
一种制造重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子的方法 |
摘要 |
本发明涉及一种利用基因工程技术制造重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子方法,其目的在于提高粒-巨噬细胞集落刺激因子的表达水平,便于纯化制备。利用PCR技术改构其cDNA成熟肽编码区5′端,消除其强二级结构,将其插入高效表达载体,受热诱导后得到高效表达,分离包含体、溶解、复性、纯化后得到比活性>1×10<SUP>7</SUP>,纯度>98%的重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子纯品,可以满足临床应用要求。 |
申请公布号 |
CN1129255A |
申请公布日期 |
1996.08.21 |
申请号 |
CN95101619.9 |
申请日期 |
1995.02.16 |
申请人 |
中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
发明人 |
汲言山;沈倍奋 |
分类号 |
C12N15/27;C12N15/63;C12P21/00 |
主分类号 |
C12N15/27 |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
1.一种利用基因工程技术制造重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子的方法,其特征在于用PCR方法对人粒-巨噬细胞集落刺激因子cDNA的改构,获得重组质粒以及对此工程菌进行表达,经离心、洗涤液洗涤、回收包含体、尿素溶解、稀释复性液中复性,经Q-Sepharose FF和Sephacryl S-200层析柱纯化,分步收集可得重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子纯品。 |
地址 |
100850北京市海淀区太平路27号 |