棉花的再生和转化

摘要

本发明提供了一种从外植体(它为胚轴、子叶或其混合物)开始通过组织和悬浮培养而再生棉花的方法。也介绍了通过选择培养转化棉花以改进棉花的方法。

主权项

1.一种转化棉花的方法，该方法包括：a)在第一或第二愈伤组织生长培养基中，使正在进行再生的棉花外植体与含有异源于棉花的可表达基因密码的土壤杆菌载体接触足够时间，使该基因转移到外植体的细胞中，在再生期间，在含有葡萄糖作为碳源的第一愈伤组织生长培养基中将外植体培养足够时间，以使未分化的愈伤组织发育，然后在含有蔗糖作为碳源的第二愈伤组织生长培养基中培养；b)在温度约为25—35℃、16小时光照与8小时无光照交替的条件下，在用于转化的外植体再生的合适的第一或第二愈伤组织培养基中培育含有转移基因的细胞15—200小时；c)使培育后的外植体与含有对土壤杆菌具有毒性的抗生素的合适的第一或第二愈伤组织生长培养基接触足够时间，以杀死土壤杆菌；d)在适于外植体培养的第一或第二愈伤组织生长培养基中培养无土壤杆菌的外植体；e)从含有未转化细胞的未转化的愈伤组织中选择含有转化细胞的愈伤组织。