PROCEDIMIENTO PARA LA EXPRESION DE PROTEINAS HETEROLOGAS FUSIONADAS EN E. COLI, UTILIZACION DE LAS MISMAS, VECTORES DE EXPRESION Y CEPAS RECOMBINANTES.

摘要

LA PRESENTE INVENCION ES RELATIVA AL CAMPO DE LA BIOTECNOLOGIA Y EN PARTICULAR AL USO DE TECNOLOGIA DE RECOMBINACION DE DNA PARA LA PRODUCCION DE PROTEINAS HETEROLOGAS. EL OBJETO TECNICO DE ELLA ES DESARROLLAR UN METODO ALTAMENTE EFICIENTE PARA LA EXPRESION DE GENES HETEROLOGOS DE FORMA FUSIONADA EN "ESCHERICHIA COLI", LOS CUALES SE CODIFICAN POR PROTEINAS LAS CUALES PUEDEN SER FACILMENTE PURIFICADAS DEBIDO AL HECHO DE QUE SON SINTETIZADAS EN FORMA SOLUBLE EN EL CITOPLASMA CELULAR. PARA CONSEGUIR ESTO, SE USA UN VECTOR DE EXPRESION, EL CUAL CONTIENE UNA SECUENCIA ESTABILIZADORA LA CUAL SE CODIFICA SOLO PARA LOS PRIMEROS 58 AMINO ACIDOS PERTENECIENTES AL EXTREMO N-TERMINAL DE LA PROTEINA HUMANA INTERLEUKIN-2, LA CUAL ESTA BAJO EL PROMOTOR TRIPTOFANO DEL ACTUAL "ESCHERICHIA COLI". ESTE VECTOR CONTIENE ADEMAS EL GEN PARA RESISTIR LA AMPICILINA COMO UNA MARCA DE SELECCION Y EL TERMINADOR DEL ION DE TRANSCRIPCION DEL BACTERIOFAGO T4. EN PARTICULAR LOS GENES LOS CUALES SE CODIFICAN POR LAS PROTEINAS ANTIGENAS DEL VIRUS DE INMUNODEFIENCIA HUMANA (VIH 1 Y 2) SERAN CLONADOS EN EL, OBTENIENDOSE ALTOS NIVELES DE EXPRESION DE DICHA PROTEINA DE LOS LINAJES TRANSFORMADOS DE LA BACTERIA "ESCHERICHIA COLI". EL METODO, EL CUAL ES EL OBJETO DE LA PRESENTE INVENCION, SE PUEDE EMPLEAR PARA LA EXPRESION DE PROTEINAS HETEROLOGAS, RECOMBINADAS EN ALTOS NIVELES, SINTETIZADAS EN FORMA INSOLUBLE Y FUSIONADA EN "E. COLI", LAS CUALES SE PUEDEN USAR EN LA INDUSTRIA FARMACEUTICA PARA OBTENER PREPARACIONES DE VACUNA O EN EL DESARROLLO DE SISTEMAS DE DIAGNOSTICOS, EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA, EN AGRICULTURA,ETC