Verfahren zur Herstellung von Viren und viralen Vektoren mittels Transfektion von Säugetierzellen mit Komplexen aus viraler DNA und einem Polykation, das gegebenenfalls mit einem Liganden für die Zielzelle konjugiert ist, in Gegenwart eines endosomolytischen Mittels. Das Verfahren bringt besondere Vorteile für die Produktion von rekombinanten Retroviren, Adenoviren und Adeno-assoziierten Viren in der Zelle, wobei es hohe Virustiter in Verpackungszellinien sowie in primären Zellen ermöglicht. Anwendungsgebiet ist vor allem die Gentherapie.