| 主权项 |
1. 一种处理哺乳动物全血检体之红血球之方法,其 可连 续以光电方式有效测量,其包含有含有两性离子球 化剂处 理抗凝固全血检体,该球化剂存于试剂中且其浓度 大体可 使该全血检体中成熟红血球及网织红血球球化,以 当该检 体与试剂进行流式细胞计数光散射测量时能除去 位向杂讯 。2. 根据申请专利范围第1项之方法,其中该两性 离子球化 剂于稀释样本中浓度3.9微克/毫升至148微克/毫升 。3. 一种使用流式细胞计数器来监定血液检体中 所关注次 类红血球之方法,其包含如下步骤: (a) 混合该等份之血液检体和含有两性离子球化剂 之试剂 组合物溶液以形成悬浮液,其中该试剂组合物包含 0.5至2 .0倍等张之张力溶液; (b) 该步骤(a)的悬浮液实质上每单位时间以一个红 血球 经过聚光照明区; (c) 侦测及测量每一红血球光散射和光吸收;且 (d) 至少以该散射光和吸收光之测量大小部份为依 据来区 分关注的该次类之该红血球。4. 根据申请专利范 围第3项之方法,其中步骤(a)包含加 染料化合物至选择性染色所关注之次类红血球;步 骤(c) 包含侦测及测量每个红血球之光散射及光吸收;步 骤(d) 包含在至少以该散射及吸收光之测量大小部份为 依据来区 分关注的该次类之该红血球。5. 一种使用流式细 胞计数哈来监定血液检体中所关注次 类红血球之方法,其包含如下步骤: (a) 混合该等份之血液检体液和试剂组合物溶液以 形成悬 浮液,其中含染料化合物之试剂组合物可染色红血 球的核 酸,维持酸硷度6到9的缓冲液和两性离子界面活性 剂; (b) 该步骤(a)的悬浮液实质上每单位时间以一个红 血球 经过聚光照明区; (c) 侦测及测量每一红血球光散射和光吸收;并且 (d) 至少以该散射光和吸收光大小部份为依据来区 分关注 的该次类之该红血球。6. 根据申请专利范围第5项 之方法,其中步骤(a)所述之 该染料化合物系阳离子染料,且该总缓冲浓度系等 张于血 液检体中等容球化红血球。7. 根据申请专利范围 第5项之方法,其中步骤(a)界面活 性剂系选自月桂醯胺丙基甜菜 ,N-十四烷基-N,N-二 甲 基-3-氨基-1-丙烷磺酸盐,N-十二烷基-N,N-二甲基-3- 氨基-1-丙烷磺酸盐,椰醯胺丙基甜菜 及椰醯胺磺 酸基 甜菜 。8. 一种使用流式细胞计数器来特征化全血 检体中网织红 血球和红血球之方法,其包含如下步骤: (a) 混合该等量血液检体和含一种有机阳离子染料 化合物 ,一种两性离子界面活性剂和一种缓冲液以形成悬 浮液, 其中该染料化合物可染网织红血球的核醣核酸; (b) 该步骤(a)的悬浮液实质上每单位时间以一个细 胞经 过聚光照明区; (c) 侦测及测量每一细胞光散射和光吸收; (d) 以该光散射和光吸收之测量大小为依据来监定 经染色 细胞和未经染色细胞;及 (e) 以该散射光和吸收光之测量大小为依据来决定 网织红 血球或红血球的数目,体积,血红素浓度,和RNA浓度 。9. 根据申请专利范围第8项之方法,其中步骤(a) 所述之 界面活性剂为烷基甜菜 或烷醯胺基甜菜 。10. 根 据申请专利范围第8项之方法,其中步骤(a)所述之 界面活性剂系选自月桂醯胺丙基甜菜 ,N-十四烷基 -N, N-二甲基-3-氨基-1-丙烷磺酸盐,N-十二烷基-N,N-二甲 基-3-氨基-1-丙烷磺酸盐,椰醯胺丙基甜菜 及椰醯 胺研 磺酸基甜菜 。11. 根据申请专利范围第8项之方法, 其中步骤(a)所述之 界面活性剂含量3.9微克/毫升至148微克/毫升。图 示简单说明: 图1A,1B及1C分别为实现本发明的原理散射/吸收流 式细 胞计数器的照明透镜、侦测透镜和侦测信号处理 系统的图 解模型。 图2A(1)和2B(1)为红色光散射对红色光吸收的细胞图 图2A(2)和2B(2)系依照实例1分别以 750及新亚甲基蓝 对含网织红血球及部份球化之红血球全血检体染 色其红光 低角度散射对红光高角度散射的细胞图。 图3A(1)及3B(1)系红色光散射对红色光吸收之细胞图 ,且 3A(2)及3B(2)系依实例2分别以 750及新亚甲基蓝对含 有全球化之红血球及网织红血球之全血检体染色 的红光低 角度散色对红光高角度散色之细胞图。 图4A和4B表示依照实例3以 750染料染网织红血球并 得 到MCV和MCHC値之间的相关性。 图5A(1)及5B(1)系红色光散射对红色光吸收,且图5A(2) 及5B(2)系依实例3之假吸收校正作用,分别以 750及 新亚甲基蓝对含有全球化红血球及网织红血球之 全血检体 染色的红光低角度散色对红光高角度散色之细胞 图; 图6表示依实例3中NCCLS参考法及使用含 750之本发 明 试剂侦测全血检体中网织红血球百分比之比较。 图7系为血红素浓度对体积之细胞图,其中以"+"为 网织红 血球且以"■"代表红血球;且 图8A及8B分别为未染色,未球化红血球细胞之红色 光散射 对红色光吸收,及红色光高角度散射对红色光低角 度散射 之细胞图;8C及8D系未染色,未球化红血球细胞之相 似细 |
