摘要 |
<p>Zur Bestimmung der Aktivität von Lipasen tierischer, pflanzlicher und mikrobieller Herkunft sowie insbesondere im Serum detektierbarer Lipasen wurde eine Methode auf fluorimetrischer Basis entwickelt. Zu diesem Zweck wurden fluorogene Triglyceridanaloge synthetisiert, in denen eine Acyl- oder Alkylkette am φ-Ende einen Fluorophor und eine andere einen Fluoreszenzquencher trägt. Für die Aktivitätsbestimmung wird das fluorogene Lipid mit Amphiphilen in Form von Liposomen, Vesikeln, Micellen oder Emulsionen solubilisiert. Das fluorogene Substrat kann auch als solches im wäßrigen Medium verteilt oder in organischen Lösungsmitteln gelöst dem Enzym angeboten werden. Als neue Solubilisierungsform für Substrate in der Lipaseanalytik werden Komplexe von fluorogenen Triglyceriden mit geeigneten Proteinen (z.B. Albumin) im wäßrigen Medium erstmals beschrieben. Die Aktivität der fettspaltenden Enzyme wird über die Hydrolyse des fluorogenen Substrates bestimmt, die mit einem kontinuierlichen Anstieg der Fluoreszenzintensität verbunden ist.</p> |