集落刺激因子的制备方法

摘要

本发明涉及一种用悬浮式细胞培养和层析技术制备含多种生物活性成分的集落刺激因子的方法，本发明的特点是，将人体组织制成细胞悬浮液，经体外诱导和培养，再经超滤、盐析、透析以及离子交换层析和糖蛋白亲和层析，透析后制成含多种活性成分的集落刺激因子。该方法的优点是生产工艺简单，回收率高，制品疗效好。

主权项

1、一种制备含多种活性成分的集落刺激因子的方法，其特征在于，在无菌条件下将人体组织制成细胞悬浮液；在含有诱导剂的培养基中将细胞悬浮液进行体外诱导和悬浮培养，制成培养液；诱导和培养的条件为：CO2浓度5-10%(体积)，湿度94-96%，温度36.5-37.5℃，在恒温下诱导和培养3-7日；将所述培养液相继进行超滤浓缩，盐析，透析，得到蛋白溶液a；用阴离子交换树脂将蛋白溶液a进行离子交换层析，获得蛋白溶液b，将蛋白溶液b用伴刀豆蛋白A-琼脂糖凝胶进行亲和层析，得到蛋白液C；将蛋白溶液C用透析袋透析，截留分子量大于10000道尔顿，得到含有多种活性成份的集落刺激因子。