摘要 |
ESTE INVENTO RELATA A POLIMERASAS DNA TIPO T7 Y METODOS PARA USARLAS INCLUYENDO UN METODO PARA DETERMINAR LA SECUENCIA DE BASE NUCLEOTIDA DE UNA MOLECULA DNA, COMPRENDIENDO EL RECOCIDO DE DICHA MOLECULA DNA CON UN PRIMERA MOLECULA CAPAZ PARA HIBRIDIZAR A DICHA MOLECULA DNA; INCUBAR PARTES SEPARADAS DE LA MEZCLA RECOCIDA EN AL MENOS CUATRO VASOS CON CUATRO DIFERENTES TRIFOSFATOS DEOXINUCLEOSIDO, UNA POLIMERASA DNA PROGRESIVA, EN EL QUE DICHA POLIMERASA PERMANECE LIGADA A DICHA MOLECULA DNA POR AL MENOS 500 BASES ANTES DE DISOCIARSE EN CONDICIONES AMBIENTALES NORMALMENTE USADAS EN LA REACCION DE EXTENSION DE UNA REACCION SECUENCIADORA DNA, DICHA POLIMERASA TIENE MENOS QUE 500 UNIDADES DE ACTIVIDAD EXONUCLEASA POR MG DE DICHA POLIMERASA, Y UNO DE CUATRO AGENTES TERMINADORES DE SINTESIS DNA QUE TERMINA LA SINTESIS DNA A UNA ESPECIFICA BASE NUCLEOSIDA. EL AGENTE TERMINA A UNA DIFERENTE BASE NUCLEOTIDA ESPECIFICA EN CADA UNO DE LOS CUATRO VASOS. LOS PRODUCTOS DNA DE LA REACCION INCUBADORA SON SEPARADOS ACORDES A SU TAMAÑO TAL QUE AL MENOS PARTE DE LA SECUENCIA DE BASE NUCLEOTIDA DE LA MOLECULA DNA PUEDA SER DETERMINADA. |