摘要 |
En fremgangsmåte for kloning av xylanasekloner fra en anaerob vomsopp som innbefatter følgende trinn: (i) dyrking av en anaerob vomsopp: (il) isolering av total RNA fra kulturen i trinn (i); (lii) Isolering av poly A+ mRNA fra total RNA referert til i trinn (il); (iv) konstruering av et cDNA ekspresjonsbibliotek; (v) legering av cDNA til en bakteriofag ekspresjonsvektor valgt fra XZAP, XZAPII eller vektorer med lignende egenskaper; (vi) screening av xylanasepositive rekombinante kloner i et kulturmedium som inkorporerer xylan ved detektering av xylanhydrolyse; og (vil) rensing av xylanasepositive rekombinante kloner, er beskrevet. Det er også tilveiebragt xylanasepositive rekombinante kloner produsert ifølge ovennevnte metode, samt xylanasepositive rekombinante kloner med følgende egenskaper; (i) produksjon av xylanklaringssoner i en kultur inneholdene xylanase cDNA avledet fra N- patriciarum; (ii) som har aktivitet for hydrolyse av xylan, men ingen aktivitet i relasjon til hydrolyse av CMC eller krystallinsk cellulse. Forskjellige cDNA molekyler som kan bli anvendt i ovennevnte fremgangsmåte er også beskrevet.
|