PROCEDURE FOR THE EXPRESSION OF HETEROLOGOUS GENES IN PICHIA PASTORIS YEAST, EXPRESSION VECTORS AND TRANSFORMED MICRO-ORGANISMS.

摘要

ESTA RELACIONADA CON LA RAMA DE LA BIOTECNOLOGIA Y ESPECIFICAMENTE CON LA COMO FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDERMICO HUMANO (EGFH) Y SUCROSA INVERTASA. TECNOLOGIA DEL ADN RECOMBINANTE PARA LA PRODUCCION DE PROTEINAS HETEROLOGAS. EL OBJETIVO TECNICO DE LA MISMA CONSISTE EN DESARROLLAR UN PROCEDIMIENTO ALTAMENTE EFICIENTE PARA LA EXPRESION DE GENES HETEROLOGOS, EMPLEANDOSE COMO HOSPEDERO UN MUTANTE AUXOTROFICO HIS3 DE LA CEPA BKM-90 DE PICHIA PASTORIS Y COMO ADN RECOMBINANTE PARA SU TRANSFORMACION UN VECTOR INTEGRATIVO QUE CONTIENE UN MARCADOR DE SELECCION FUNCIONAL DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE, EL PROMOTOR DEL GEN ALCOHOL OXIDASA (AOX 1) DE LA PROPIA LEVADURA, COMO TERMINADOR DE LA TRANSCRIPCION EL DE LA GLICERALDEHIDO-3-FOSFATO DESHIDROGENASA (GAP) DE S.CEREVISIAE, O EL QUE PORTE EL GEN HETEROLOGO A EXPRESAR, Y OTRA SECUENCIA HOMOLOGA AL GENOMA DE PICHIA PASTORIS QUE SIRVE PARA LA INTEGRACION DEL MISMO. LOS VECTORES DE EXPRESION EMPLEADOS CONTIENEN ADEMAS UN GEN HETEROLOGO ACOPLADO AL PEPTIDO SEÑAL DEL GEN SUCROSA INVERTASA (SUC2) DE S. CEREVISIAE. ESTE PROC EDIMIENTO GARANTIZA QUE LOS PRODUCTOS POLIPEPTIDICOS SEAN RECUPERABLES BAJO CONDICIONES REGULABLES Y CON ALTOS RENDIMIENTOS. LAS CEPAS OBTENIDAS, OBJETO DE LA PRESENTE INVENCI PUEDEN SER EMPLEADAS PARA LA PRODUCCION EN GRAN ESCALA DE PRODUCTOS FARMACEUTICOS O DE ENZIMAS DE INTERES INDUSTRIAL/!