发明名称 蛋白质酵素抑制剂之生产方法
摘要 一种利用转型酵母菌株生产重组基因之脱硫水蛭素的新颖方法。这个新颖方法主要是使用含有酵母菌起动子CUP1的表现卡带(expression cassette)。本发明也有关该转型的酵母菌株,新颖的表现载体和其生产方法。
申请公布号 TW236638 申请公布日期 1994.12.21
申请号 TW082106863 申请日期 1993.08.25
申请人 诺华股份公司;优思比珍药股份公司 发明人 朱塔.海姆;竹森.库拉;彼得.富斯特;汤姆斯.哈提格;贾布瑞.包利士
分类号 C12N15/81;C12P21/02 主分类号 C12N15/81
代理机构 代理人 郭鸿宾 台北巿嘉兴街一七九之六号
主权项 1.一种生产脱硫酸根水蛭素之方法,该方法包括:在 一复 合培养基中培养一含表现载体之啤酒酵母菌株,该 表现载 体含一脱硫酸根蛭素之表现卡带,该表现卡带系由 酵母菌 CUP1起动子(经手术操作可连接到编码一酵母菌讯 号胜 之第一DNA序列上,该酵母菌讯号胜 系在一适当之 读架 中连接在编码脱硫酸根水蛭素之第二DNA序列上)及 一含酵 母菌转录终止讯号之一DNA序列所组成,由肉汤培养 基中 分离所生产之脱硫酸根水蛭素,其培养基中要正在 接种时 补充以诱导一铜盐量之CUP1起动子。2.如申请专利 范围第1项之方法,其中之脱硫酸根水蛭素 系由脱硫酸根水蛭素变体HV1,HV2,HV3及其任一之衍 生 物所组成之一组中选出者。3.如申请专利范围第1 项之方法,系用来生产脱硫酸根水 蛭素变体HV1之方法。4.如申请专利范围第1项之方 法,其中之酵母菌株为一啤 酒酵母菌Cir菌株。5.如申请专利范围第1项之方法 ,其中之酵母菌株系有单 一或多重蛋白缺陷者。6.如申请专利范围第5项 之方法,其中之酵母菌株是在羧 基胜 ysc及yscY活性有缺陷者。7.如申请专利范 围第1项之方法,其中之酵母菌株含有0 -16,特别是2-6份染色体CUP1基因于啤酒酵母菌染色 体 内。8.如申请专利范围第1项之方法,其中之酵母菌 株含有1 -3份额外染色体ACE1基因于啤酒酵母菌染色体内。9 .如申请专利范围第1项之方法,其中之酵母菌株有2 套 或大于2套染色体。10.如申请专利范围第9项之方 法,其中之酵母菌株为有 两套染色体之菌株。第一图质体pPFY56的图表说明 。第二 图质体pPFY58的图表说明。第三图质体pPFY59R的图表 说
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