摘要 |
UN METODO PARA LA MODIFICACION GENOMICA, ESPECIFICA EN CUANTO A LA POSICION, DE LEVADURAS DEL GENERO PICIA, Y NUEVAS SECUENCIAS DE DNA, UTILES PARA ELLO. LA LEVADURA PICHIA SE TRANSFORMA CON UN FRAGMENTO DE DNA LINEAL DISPUESTO EN SERIE, QUE CONTIENE LOS FRAGMENTOS PRIMERO Y SEGUNDO DE DNA INSERTABLES A CADA LADO DEL GEN MARCADOR. LAS SECUENCIAS DE DNA INSERTABLES SON HOMOLOGAS A LAS PORCIONES DEFINIDAS DEL GENOMA DE PICHIA Y SE INTEGRAN POR RECOMBINACION EN LAS CITADAS POSICIONES DEFINIDAS. EL ORGANISMO TRANSFORMADO RESULTANTE CONTIENE EL GEN MARCADOR Y ALGUNAS SECUENCIAS ADICIONALES DE DNA QUE SE SITUAN ENTRE LOS FRAGMENTOS DE DNA INSERTABLES. ADEMAS DICHA LEVADURA CONTIENE UNA SECUENCIA INTERRUMPIDA O INCOMPLETA EN LA POSICION DE LA MODIFICACION GENOMICA. SE OBSERVA PRODUCCION AUMENTADA DE PRODUCTOS DE GEN HETEROLOGO, CUANDO SE USAN COMO HUESPED CEPAS DE EXPRESION EN LAS QUE EL GEN ALCOHOL OXIDASA HA SIDO INTERRUMPIDO. SE HA DESCUBIERTO TAMBIEN LA EXISTENCIA DE UN SEGUNDO GEN DE ALCOHOL OXIDASA EN PICHIA.
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