摘要 |
On prépare une protéine recombinée hautement purifiée obtenue par voie immunologique, codée par un gène de lipoprotéine Borrélia de type sauvage à longueur totale, notamment l'OspA codée par le gène OspA de B.burgdorferi, utile dans des vaccins et des kits de tests de dépistage de l'arthrite, par induction de la production de protéine à partir d'un organisme hautement transformé au moyen d'un plasmid vecteur contenant le gène cloné, puis récupération et purification de la protéine. On procède à la lyse de l'organisme mis en culture puis on le met en contact avec un tensio-actif, notamment le Triton X-114, lequel extrait de manière sélective la protéine voulue des cellules lysées. Lorsque l'on chauffe le mélange obtenu à une température moyennement élevée, une phase détersive se sépare et est récupérée séparément des autres phases. Ensuite, on purifie la phase détersive de protéines résiduelles par chromatographie sur colonne. |