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SE AISLAN PROTEINAS SNRNP, POR CROMATOGRAFIA DE INMUNOAFINIDAD, UTILIZANDO ANTICUERPOS DE UNA MUESTRA DE SUERO DE UN SER VIVO AFECTADO POR LUPUS ERITEMATOSUS SITEMICO. LOS POLIPEPTIDOS SM-B Y/O SM-B'' SE AISLAN A PARTIR DEL COMPLEJO PROTEINICO SNRNP POR ELECTROFORESIS DE GELES Y ELECTROELUCION. LUEGO SE SECUENCIAN LOS AMINO TERMINALES DE LOS POLIPEPTIDOS SM-B Y/O SM-B'', Y SE SINTETIZAN LAS SONDAS DE DNA MARCADAS CON SECUENCIAS DE NUCLEOTIDOS COMPLEMENTARIAS CON LAS QUE CODIFICAN LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS. UNA BIBLIOTECA DE CDNA HUMANO EN UN VECTOR DE CLONACION LAMBDA SE TRANSFIERE A FILTROS ADECUADOS TALES COMO FILTRO DE NITROCELULOSA. ESTOS FILTROS SON INVESTIGADOS POR HIBRIDACION CON SONDAS MARCADAS PARA IDENTIFICAR LOS CLONES DE CDNA EN LA BIBLIOTECA CON SECUENCIAS QUE IGUALAN A LAS DE LAS SONDAS MARCADAS. LUEGO SE SUBCLONA EL CDNA QUE CODIFICA LAS PROTEINAS DE SM-B Y/O SM-B''. LUEGO SE AISLAN LOS POLIPEPTIDOS DE SM-B Y/O SM-B'' POR CROMATOGRAFIA DE INMUNOAFINIDAD Y, SI SE DESEA ADEMAS,POR CROMATOGRAFIA HPLC. LUEGO SE HACE UN ENSAYO CON LOS POLIPEPTIDOS DE SM-B Y/O SM-B'' AISLADOS HACIENDO REACCIONAR DICHOS POLIPEPTIDOS CON UNA MUESTRA DE SUERO DE UN SER VIVO PARA DETERMINAR SI ESTE ESTA AFECTADO POR LUPUS ERITEMATOSUS SISTEMICO. EL ENSAYO TAMBIEN SE PUEDE HACER CON UNA MEZCLA DE LOS POLIPEPTIDOS DE SM-B Y/O SM-B'' AISLADOS Y UN POLIPEPTIDO DE SM-D AISLADO (AISLADO ESENCIALMENTE COMO SE DESCRIBIO ANTES). EL ENSAYO SE PUEDE LLEVAR A CABO CON INMUNOABSORBENTE LIGADO A ENZIMA, TAL COMO ANTICUERPOS DE IGG-IGM ANTIHUMANO UNIDOS COVALENTEMENTE A UN INDICADOR ENZIMATICO. LACTOPEROXIDASA FOSFATASA ALCALINA SON CADA UNA UN EJEMPLO DE UN INDICADOR ENZIMATICO PARA INDICAR, MEDIANTE UN COLOR CARACTERISTICO, UNA PERSONA AFECTADA.
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