PROCEDIMIENTO PARA LA PURIFICACION DE DOS ISOENZIMAS LIPASA DE CANDIDA RUGOSA.

摘要

PROCEDIMIENTO PARA LA PURIFICACION DE DOS ISOENZIMAS LIPASA DE CANDIDA RUGOSA. PROCEDIMIENTO PARA LA PURIFICACION DE DOS LIPASAS EXTRACELULARES PRESENTES EN LIPASA BRUTA COMERCIAL DE LA LEVADURA CANDIDA RUGOSA. EL METODO CONSTA DE UN SOLO PASO DE CROMATOGRAFIA HIDROFOBICA EN MATRIZ DE AGAROSA. CONDICIONES DE ELUCION MUY DIFERENTES PERMITEN LA COMPLETA SEPARACION Y PURIFICACION DE DOS ENZIMAS CON ACTIVIDAD LIPASICA (LIPASAS A Y B) PRESENTES EN EL EXTRACTO COMERCIAL DE PARTIDA. PARA ELLO SE UTILIZA UN TAMPON CONCENTRADO DE PH 6 A 8, CON EL QUE SE ELUYEN DE LA COLUMNA GRAN PARTE DE LOS CONTAMINANTES PRESENTES EN EL EXTRACTO; LUEGO CON LA MISMA SOLUCION TAMPON MAS DILUIDA SE ARRASTRA LA LIPASA B. POSTERIORMENTE, CON UN DI O POLIALCOHOL DISUELTO EN EL TAMPON DILUIDO SE ELUYE LA LIPASA A, DE CUYA SOLUCION, MEDIANTE CONCENTRACION POR ULTRAFILTRACION Y CROMATOGRAFIA DE EXCLUSION MOLECULAR CON DEXTRANO, SE ELIMINA EL ALCOHOL. SE APLICA INDUSTRIALMENTE EN LA PURIFICACION DE ENZIMAS.