METHODS TO CLONE mRNA.

摘要

Un procédé, qui permet d'isoler des ARN messagers sous forme d'ADN complémentaires, recourt à l'amplification enzymatique du génome à l'aide d'au moins deux amorces à oligodésoxynucléotides. Dans une varainte, la première amorce contient une séquence capable de s'hybrider à un site placé immédiatement en amont du premier ribonucléotide A de la queue polyA de l'ARN messager et la deuxième amorce contient une séquence arbitraire. Dans une autre variante, la première amorce contient une séquence capable de s'hybrider à un site incluant la séquence du signal polyA de l'ARN messager et la deuxième amorce contient une séquence arbitraire. Dans une autre variante, la première amorce contient une séquence arbitraire et la deuxième amorce contient une séquence capable de s'hybrider à un site incluant la séquence Kozak. Dans une autre variante, la première amorce contient une séquence qui est en pratique complémentaire de celle d'un ARN messager comportant une séquence connue et la deuxième amorce contient une séquence arbitraire. Dans une autre variante, la première amorce contient une séquence arbitraire et la deuxième amorce contient une séquence qui est sensiblement identique à celle d'un ARN messager qui contient une séquence connue. La première amorce sert à la transcription invere de l'ARN messager et l'ADN complémentaire résultant est amplifié au moyen d'une polymérase utilisant la première et à la deuxième amorces comme ensemble d'amorçage.