| 摘要 |
<p>Es wird ein ultrasensitives Verfahren zum Nachweis von Reverser Transcriptase (RT) Aktivität vorgeschlagen, welches sich in drei Schritte gliedert: im ersten Schritt wird das Untersuchungsmaterial aufgearbeitet, indem in einem Reaktionsgemisch eine Template-Primer-Kombination vorgelegt wird und die im aufgearbeiteten Untersuchungsmaterial vorhandene RT-Aktivität so zur Bereitstellung einer in einem bestimmten Nukleinsäureamplifikationsverfahren zu vermehrenden Nukleinsäure verwendet wird, dass eine solche ausschliesslich dann bereitgestellt wird, wenn im Untersuchungsmaterial RT-Aktivität vorhanden ist; im zweiten Schritt wird die zu vermehrende Nukleinsäure amplifiziert, wobei ein Amplifikationsprodukt erzeugt wird. Im dritten Schritt wird das Amplifikationsprodukt analysiert und identifiziert; gegenüber herkömmlichen RT-Assays wird eine Sensitivitätssteigerung in der Grössenordnung von mehreren Millionen erreicht, wodurch der ultrasensitive Nachweis von RT-Aktivität ermöglicht wird, und damit der Nachweis aller Retroviren sowie aller anderen Retroelemente, die aktive RT enthalten oder exprimieren. Das Verfahren ist von Wichtigkeit für die Diagnose von Infektionen und Krankheiten, die durch diese bei Mensch, Tieren und Pflanzen verursacht werden. Für Forschung und Diagnostik werden Screening- und Typisierungs-Kits vorgeschlagen.</p> |
