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<p>Procédé réitératif permettant d'obtenir les glycosyltransférases utiles à la synthèse, catalysée par glycosyltransférase, d'une composition de saccharide, et qui consiste à lier en série des unités de saccharide présélectionnées, sur une fraction accepteur immobilisée qui est un élément choisi dans le groupe composé de protéines, de glycoprotéines, de lipides, de glycolipides et d'hydrates de carbone. Le procédé comprend une première répétition qui consiste à (i) mettre en contact une fraction accepteur, immobilisée sur un support solide ou semi-solide, avec un mélange contenant au moins une glycosyltransférase dans des conditions permettant à ladite glycosyltransférase de se lier efficacement à la fraction accepteur immobilisée, ce qui produit un complexe fraction accepteur immobilisée-glycosyltransférase, et (ii), à mettre en contact le complexe avec un saccharide présélectionné, en présence de co-réactifs et dans des conditions appropriées pour effectuer la fixation de l'unité de saccharide présélectionnée sur la fraction accepteur immobilisée catalysée par la glycosyltransférase, et de façon à libérer celle-ci du complexe et à obtenir un produit immobilisé. Ces étapes sont suivies d'une seule répétition ou de plusieurs répétitions ultérieures de (i) et (ii), de façon à utiliser le produit immobilisé de l'étape (ii) d'une répétition donnée comme la fraction accepteur immobilisée de l'étape (i) de la prochaine répétition, jusqu'à ce que la composition de saccharide cible soit obtenue, toutes les glycosyltransférases nécessaires étant ainsi également obtenues.</p> |
