PURIFICATION OF A PERTUSSIS OUTER MEMBRANE PROTEIN.

摘要

Dans cette invention, la pertactine (auparavant dénommée protéine 69 kDa) est récupérée sous une forme stable et biologiquement pure sans la moindre activité détectable d'adénylate cyclase, dans un bouillon de fermentation provenant des cellules. Ledit bouillon est traité pour éliminer de manière sélective la toxine de la coqueluche (PT) et l'hémagglutinine filandreuse (FHA); la pertactine est précipitée par du sulfate d'ammoniaque puis le précipité est dissous dans un tampon à un pH compris entre 6,0 et 8,5, la solution traversant ensuite des colonnes chromatographiques au Q-sépharose et à l'hydroxyapatite, avant l'ultrafiltration finale. Les cellules sont extraites avec de l'urée puis l'extrait est ultrafiltré et diafiltré. La pertactine est précipitée à partir de l'extrait et le précipité est traité comme indiqué ci-dessus. Dans un autre mode d'exécution, le bouillon est mis en contact avec du sulfate d'ammoniaque pour précipiter la pertactine, le PT et le FHA, puis le précipité est dissous et le PT et le FHA sont sélectivement éliminés avant que la solution passe dans les colonnes chromatographiques.