| 主权项 |
1﹒一种c型肝炎病毒核心抗原蛋白质,其如下列胺 基酸序列:2﹒根据申请 专利范围第1项之C型肝炎病毒核心抗原蛋白质,分 子量为25,000 。 3﹒一种编码C型肝炎病毒核心抗原蛋白质之核有 酸片段及其简并序列,系编 码如申请专利范围第1项之胺基酸序列。 4﹒根据申请专利范围第3项之核甘酸片段及其简 并序列,其如下列核有酸序 列:5﹒根据申请专利范围第3项之核甘酸片段及其 简并序列,系用以制 备检测C型肝炎病毒之核酸探针。 6﹒一种选殖编码C型肝炎病毒核心抗原蛋白质之 核甘酸片段之方法,其包含 :(1)由经确定为C型肝炎病人之血清中分离出C型肝 炎病毒之核糖核 酸(RNAs)(2)合成一段C型肝炎病毒之cDNA;及(3)以聚 合连锁反应(PCR)选殖出如申请专利范围第3项之核 甘酸片段及其 简并序列。 7﹒根据申请专利范围第6项之方法,其中所选殖出 核甘酸片段为EN─80 ─2。 8﹒一种生产C型肝炎病毒核心抗原蛋白质之方法, 其包含:(1)由经确定 为C型肝炎病人之血清中分离出C型肝炎病毒之核 糖核酸(RNAs)( 2)合成一段C型肝炎病毒之cDNA;(3)以聚合连锁反应( PCR)选殖出如申请专利范围第3项之核甘酸片 段及其简并序列。(4)将该绰码C型肝炎核心抗原蛋 白质之核甘酸片段选殖入可在大肠菌体中 表现之质体中,而得表现载体;(5)将该表现载体转 形入大肠菌体中;(6)培育该转形之大肠菌;及(7)分 解菌体而分离出C型肝炎病毒核心抗 原蛋白质而得。 9﹒根据申请专利范围第8项之方法,其中所得表现 之质体为pEN─2。 10﹒根据申请专利范围第8项之方法,其中该表现质 体系在Lac转录启动 子之控制下表现C型肝炎病毒核心抗原蛋白质。 11﹒一种在体外检测C型肝炎之方法,其包含利用如 申请专利范围第1项之 C型肝炎病毒核心抗原蛋白质与检体内C型肝炎病 毒抗体结合之特性两 完成。 12﹒根据申请专利范围第11项之方法,其包含使用 西方墨溃法(West ernBlotting)完成。 13﹒根据申请专利范围第11项之方法,其包含使用 免疫分析法(immu noassay)完成。 14﹒根据申请专利范围第13项之方法,其中该免疫 分析法可以酵素或放射 性作为标帜子。 15﹒根据申请专利范围第13项之方法,其中该免疫 分析法为固相免疫分析 法。 16﹒根据申请专利范围第15项之方法,其中该固相 免疫分析法可使用微量 滴定盘作为固相吸附载体。 17﹒根据申请专利范围第13项之方法,系使用三明 治法完成。 18﹒一种检测C型肝炎之诊断套组,其包含(1)经如申 请专利范围第1项 之C型肝炎病毒核心抗原蛋白质吸附之固相载体, 及(2)经标帜之第 二抗体。 19﹒根据申请专利范围第18项之诊断套组,其中该 固相载体为微量滴盘。 20﹒一种检测C型肝炎病人是否处于急性感染期( acutestage) 之诊断套组,其包含:(1)经如申请专利范围第1项之C 型肝炎病毒 核心抗原蛋白质吸附之固相载体,及(2)经标帜之抗 IgM抗体。 21﹒根据申请专利范围第18或20项之诊断套组,其中 所使用之标帜子为 酵素。 22﹒一种检测C型肝炎病毒核心抗原之IgM抗体之方 法,系包含使用如申 请专利范围第1项之C型肝炎病毒核心抗原蛋白质, 及经标帜之抗人类 IgM抗体,进行免疫分析法或西方墨渍法两完成。 23﹒一种活体外检测C型肝炎病人是否处于急性感 染期之方法,其包含将该 病人之血样,制成血清或血浆检体,使用如申请专 利范围第1项之C型 肝炎病毒核心抗原蛋白质,及经标帜之抗人类IgM抗 体,进行免疫分 析法或西方墨渍法两完成。 24﹒一种检测C型肝炎之诊断套组,包含使用如申请 专利范围第1项之C型 肝炎病毒核心抗原及一段或多段C型肝炎病毒之非 结构性蛋白质。图示简单说明 图1系推测C型肝炎病毒蛋白质及基 因组构成之假想图。 图2为依据本发明将选殖得之cDNA片 段插入载体而得表现载体pEN 2之构筑 图。 图3根据本发明制得之表现载体pEN 一2在宿主中表现得之蛋白质之电泳分析 ,得知其分子量为25,000。 图4为利用C型肝炎病人血清进行西 方墨渍法(Western Blot)分析。依据本 发明方法而得之核心抗原蛋白质,与对照 组正常人血清(NC)及C型肝炎病人血清 (编号231,186)进行分析,发现本发 明核心抗原蛋白质可与C型肝炎病人血清 中之抗体发生结合反应,出现染色带,但 正常人血清则不然。 |
