发明名称 对热,酸及/或硷之稳定性增强而取自突变微生物的淀粉
摘要 本发明提出对热稳定及酸稳定之α-淀粉,系分离自微生物(最好属于芽孢杆菌)之经遗传工程α-淀粉基因的表现产物。可利用化学及酵素突变作用法,如亚硫酸氢盐法及于有缺口之异形双螺旋链DNA上行酵素混纳入作用。此突变型α-淀粉具有极佳特性,如在宽PH范围内有改进的热稳定性,可供工业应用于淀粉的处理及织品的脱浆。
申请公布号 TW187732 申请公布日期 1992.07.21
申请号 TW079106837 申请日期 1990.08.15
申请人 吉恩康国际有限公司;植物遗传系统公司 比利时 发明人 伊斯.拉洛奇;安德纳斯.威何玛斯.赫门纳斯.沃勒瑞特;派崔克.史坦森;马克.劳沃雷斯;惠尔曼.强尼斯.亚克士
分类号 C12N15/64;C12N15/70;C12N15/75 主分类号 C12N15/64
代理机构 代理人 林志刚 台北巿南京东路二段一二五号七楼
主权项 1.一种突变型—淀粉 ,其系为编码—淀粉 之 经突 变DNA序列之表现产物,其特征在于突变型—淀粉 所 具有的胺基酸序列与野生型酵素差异至少一个胺 基酸,即 该野生型—淀粉 之胺基酸序列系经具有如下胺 基酸取 代之突变型—淀粉 所取代:Ala-111Thr,His-133- Tyr,Thr-149-Ile,且该突变型—淀粉 呈现改进的热 稳定性及在pH低于6.5及/或高于7.5之稳定性。2.根 据申请专利范围第1项之—淀粉 ,其特征在于可 呈现改进的热稳定性。3.根据申请专利范围第1至2 项中任一项之—淀粉 ,其 用来衍生突变酵素之原始基因系得自微生物,最好 为得自 芽孢杆菌株。4.根据申请专利范围第3项之—淀 粉 ,其中该基因是 衍生自选自下列菌株之野生型基因,包括:嗜熬脂 肪芽孢 杆菌,地衣芽孢杆菌及解淀粉芽孢杆菌。5.根据申 请专利范围第1项之—淀粉 ,其特征在于酵 素和可得自地衣芽孢杆菌之野生型—淀粉 之差 异在于 第 111,133及149位置。6.一种突变基因,其系编码如 申请专利范围第1至5项中任 一项所定义之—淀粉。7.一种制备具改进热稳 定性及pH低于6.5及/或高于7.5稳 定性之如申请专利范围第1项之突变型—淀粉 的方法 ,其中,改进之热稳定性及pH低于6.5及/或高于7.5稳 定 性系由下列胺基酸取代所致:Ala-111-Thr , His- 133-Tyr , Thr-149-Ile此方法包括下列步骤:突变一 个经选殖的芽孢杆菌基因,其可编码所欲之—淀 粉 ; 分离所得的突变型淀粉 基因;藉使用选自 PB6.Liab. 2D5或PB6.Liab.D7之一表现载体将该突变型淀粉 基因 引 入至大肠杆菌或芽孢杆菌之菌株中,以表现及产制 ;培养 大肠杆菌或芽孢杆菌之菌株于一适当之培养基中; 回收所 产制的突变型淀粉 ,并监定具有改进特性的这些 突变型 淀粉 以应用于淀粉降解或织品脱浆。8.根据申请 专利范围第1至5项中任一项之—淀粉 ,其 系用于淀粉降解及织品脱浆。9.一种用以降解淀 粉的方法,其包括使用根据申请专利范 围第1至5项中任一项之经突变的—淀粉 。10.一 种处理织品脱浆的方法,其包括使用根据申请专利 范围第1至5项中任一项之经突变的—淀粉 。11. 一种淀粉降解组成物,含有根据申请专利范围第1 至5 项中任一项之经突变的—淀粉 。12.一种织品脱 浆组成物,含有根据申请专利范围第1至5
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