Peptide-amidase and its application.

摘要

Eine zur selektiven hydrolytischen Abspaltung der freien Aminogruppe am C-terminalen Ende von Peptidamiden befähigte Peptidamidase, welche die Peptidbindungen selbst nicht spaltet, kann aus dem Falvedo von Citrusfrüchten, insbesondere Orangen, gewonnen werden. Das Enzym akzeptiert D-Aminosäurereste in C-terminaler Position, allerdings mit deutlich geringerer Hydrolysegeschwindigkeit als L-Aminosäurereste. Durch Hemmstoffe von Serinproteasen wird das Enzym schwach inhibiert. Der optimale pH-Wert liegt bei 7,5 ± 1,5, die optimale Temperatur beträgt bei diesem pH 30°C. Der isoelektrische Punkt liegt bei pH 9,5 und eine gute Stabilität im pH-Bereich zwischen pH 6,0 und 9,0. In aufgereinigter Form findet man ein Molekulargewicht von 23 000 ± 3 000 dalton. Bisweilen kommt es zu Aggregaten von etwa 160 000 dalton. Die Peptidamidase eignet sich besonders für die Herstellung von Peptiden durch kontinuierliche enzymatische Umsetzung von N-geschützten Aminosäure- oder Peptidalkylestern mit Aminosäureamiden, bei der das gebildete Peptidamid mittels der Peptidamidase hydrolysiert und auf einem Anionenaustauscher vom Aminosäureamid abgetrennt wird, das zur Reaktionsmischung rezykliert werden kann.