表达人蛋白C糖基化突变体的载体和化合物

摘要

本发明描述了一种重组产生高活性酶原型人蛋白C的方法。这些酶原形式不同于天然蛋白C，它们有更高的酰胺解和功能活性及新的糖类结构。还公开了用于该方法的DNA化合物、载体和转化株。

主权项

1、一种制备重组DNA载体的方法，该方法包括将(Ⅰ)含有一种蛋白编码顺序的重组DNA化合物和(Ⅱ)含有一种启动子的DNA化合物连接起来，以便启动子在连接后定位驱动所述编码顺序的表达，所述蛋白质从氨基端到羧基端的氨基酸残基顺序如下： METTRPGLNLEUTHRSERLEULEULEUPHEVALALATHRTRPGLYILE SERGLYTHRPROALAPROLEUASPSERVALPHESERSERSERGLUARG ALAHISGLNVALLEUARGILEARGLYSARGALAASNSERPHELEUGLU GLULEUARGHISSERSERLEUGLUARGGLUCYSILEGLUGLUILEGYS ASPPHEGLUGLUALALYSGLUILEPHEGLNASNVALASPASPTHRLEU ALAPHETRPSERLYSHISVALASPGLYASPGLNCYSLEUVALLEUPRO LEUGLUHISPROCYSALASERLEUCYSCYSGLYHISGLYTHRCYSILE ASPGLYILEGLYSERPHESERCYSASPCYSARGSERGLYTRPGLUGLY ARG PHE CYS GLN ARG GLU VAL SER PHE LEU R¹CYS SER LEU ASP ASN GLYGLYCYSTHRHISTYRCYSLEUGLUGLUVALGLYTRPARGARGCYS SERCYSALAPROGLYTYRLYSLEUGLYASPASPLEULEUGLNCYSHIS PROALAVALLYSPHEPROCYSGLYARGPROTRPLYSARGMETGLULYS LYSARGSERHISLEULYSARGASPTHRGLUASPGLNGLUASPGLNVAL ASPPROARGLEUILEASPGLYLYSMETTHRARGARGGLYASPSERPRO TRPGLNVALVALLEULEUASPSERLYSLYSLYSLEUALACYSGLYALA VALLEUILEHISPROSERTRPVALLEUTHRALAALAHISCYSMETASP GLUSERLYSLYSLEULEUVALARGLEUGLYGLUTYRASPLEUARGARG TRPGLULYSTRPGLULEUASPLEUASPILELYSGLUVALPHEVALHIS PRO R₂TYR SER LYS SER THR THR ASP ASN ASP ILE ALA LEU LEU HIS LEUALAGLNPROALATHRLEUSERGLNTHRILEVALPROILECYSLEU PROASPSERGLYLEUALAGLUARGGLULEUASNGLNALAGLYGLNGLU THRLEUVALTHRGLYTRPGLYTYRHISSERSERARGGLULYSGLUALA LYS ARG R₃ARG THR PHE VAL LEU ASN PHE ILE LYS ILE PRO VAL VAL PRO HIS R₄GLU CYS SER GLU VAL MET SER ASN MET VAL SER GLU ASN METLEUCYSALAGLYILELEUGLYASPARGGLNASP.ALACYSGLUGLY ASPSERGLYGLYPROMETVALALASERPHEHISGLYTHRTRPPHELEU VALGLYLEUVALSERTRPGLYGLUGLYCYSGLYLEULEUHISASNTYR GLYVALTYRTHRLYSVALSERARGTYRLEUASPTRPILEHISGLYHIS ILEARGASPLYSGLUALAPROGLNLYSSERTRPALAPRO-COOH 其中R₁选自ASN和GLN，R₂选自ASN和GLN，R₃选自ASN和GLN，R₄选自ASN和GLN。