HOMOGENEOUS ENZYME IMMUNOASSAY.

摘要

L'invention concerne un procédé d'immunoanalyse homogène d'un ligand dans un échantillon liquide de test consistant a) à incuber un mélange de (1) l'échantillon liquide de test, (1i) le ligand soumis à l'analyse ne comportant qu'un épitope, un conjugué covalent du ligand avec n'importe quelle molécule de mono- ou poly-épitope ayant au moins un épitope distinct de l'épitope du ligand; (2) une enzyme labile; (3) un premier anticorps monoclonal bispécifique protégeant l'activité de l'enzyme par liaison à un premier épitope sur l'enzyme et capable de lier le ligand en cours d'analyse; et (4) un second anticorps monoclonal bispécifique capable de fixer ladite enzyme ainsi qu'un second épitope distinct sur le ligand en cours d'analyse, ou un épitope dudit conjugué covalent; ce qui permet de former un immunocomplexe quaternaire; b) après incubation, à soumettre le mélange à des conditions selon lesquelles n'importe quelle enzyme non présente dans un tel immunocomplexe quaternaire est inactivée; et c) à déterminer la quantité d'enzyme détectable, la détermination se rapportant à la quantité éventuelle de ligand dans l'échantillon de test. L'invention concerne également des kits de mise en oeuvre du procédé.