DETECTION AND QUANTITATIVE DETERMINATION OF RNA AND DNA.

摘要

Le procédé de détection et/ou de détermination quantitative d'ARN ou d'ADN cible dans un échantillon d'analyte comprend les étapes consistant: a) à mettre l'analyte en contact avec des particules magnétiques portant une sonde d'ADN monocaténaire fixée en position 5' capable de se lier audit ARN ou ADN; b) à mettre les particules magnétiques en contact avec une solution aqueuse d'une transcriptase ou polymérase inverse en présence de nucléotides marqués, en utilisant la sonde comme amorce de sorte qu'un ADN monocaténaire complémentaire marqué est formé si ledit ARN ou ADN était présent dans ledit analyte; à agréger magnétiquement les particules magnétiques sur une surface et à éliminer ladite solution; et c) à détecter la présence ou l'absence de ladite marque et/ou à déterminer la quantité de cette dernière. La longueur de la chaîne d'ADN monocaténaire complémentaire est limitée par exemple par une quantité prédéterminée de didésoxynucléotides présents à l'étape (B) pour limiter la synthèse de la chaîne à une longueur moyenne prédéterminée ou la liaison de la sonde audit ADN ou ARN à une distance prédéterminée d'un point terminal de la chaîne dudit ADN ou ARN. Un kit de mise en oeuvre du procédé est décrit.