Preparation and use of a human antibody gene bank (human antibody libraries).

摘要

Die Erfindung betrifft die Herstellung und Verwendung von Genbanken menschlicher Antikörper (AK). Ausgehend von einem Gemisch humaner B-Lymphozyten wird deren mRNA, unter Verwendung von Oligo-dT-Primern in cDNA übersetzt. Anschließend findet eine Amplifikation der AK-spezifischen cDNA mittels Polymerase-Ketten Reaktion (PCR, Polymerase Chain Reaction) unter Einsatz von geeigneten Oligonukleotid-Primerseguenzen statt. Durch Expression dieser amplifizierten AK-spezifischen cDNA in einem bakteriellen Expressionsvektor, z.B. dem nachstehend beschriebenen Vektor pFMT, in E.coli, steht somit eine Human-Antikörper-Bibliothek mit einem umfassenden Repertoire zum Durchprüfen ("Screenen") mit ausgewählten Antigenen in vitro zur Verfügung.