| 主权项 |
1﹒一种制备可表现天冬胺基酸酸之质体之方法,包括于一种载体质体中,嵌入含编码天冬胺基酸之aspA基因DNA片段,并于该DNA片段上游区域嵌入PL启动子,使天冬胺基酸酸之表现受到APL启动子之控制而得所欲质体。2﹒根据申请专利范围第1项之方法,其中aspA基因系得自大肠菌B。3﹒根据申请专利范围第2项之方法,其中aspA基因系得自大肠菌B染色体之Aval一NarIDAN片段。4﹒一种制备可表现天冬胺基酸之质体pAC2之方法,包括:(a)由大肠菌B染色体DNA中取AvaI一NarI间片段,其中含有依天冬胺基酸编码之aspA基因,(b)将该AvaI一NarI片段嵌入载入pBR322中,以形成pAN207,(c)由pAN207中取AvaI一BamHI片段,嵌入pGem,以形成pGB5,(d)由PGB5中AvaI一HindⅢ片段嵌入入pLB,使aspA基因受到PL启动子之控制,而形成PAC2。5﹒根据申请专利范围第4项之方法,其中含大肠菌B染色体aspA基因之AvaI一NarI片段,约具1﹒71kb。6﹒根据申请专利范围第4项之方法,其中由pAN207中取得之AvaI一BamHI片段,约具1﹒75kb。7﹒根据申请专利范围第4项之方法,其中PGB5之AvaI一HindⅢ片段(含aspA)系在PL启动子控制下。8﹒一种制备具高度表现天冬胺基酸活性之大肠菌品系之方法,包括:(a)以由申请专利范围第1项制得之质体转形作为宿主之大肠菌,(b)选殖出该经转形之大肠茵菌株,(c)进行传代培养以建立该品系。9﹒根据申请专利范围第8项之方法,其中该宿主为大肠菌N4830(E﹒coliN4830)。10﹒一种生产L一天冬胺基酸之方法,其特征在利用由申请专利范围第8项方法所建立之大肠菌品系,以提供催化反丁烯二说@趸P氨合成L一天冬胺基酸之酵素或,再藉固定化细脂法大间@q生产L一天冬胺基酸。图示简单说明图1显示本发明质体pAC2(4.88kb),系以大肠菌B 染色体中含asp A基因之Aval-Nar1 DNA片段嵌入载体中,并以PL启动子控制asp A基因表现而得。图2显示质体pAN207(5.06kb),系以大肠菌B之asp A基因DNA片段(1.71kb)嵌入载体pBR322之Aval-Narl位置而得。图3,系大肠菌B染色体Ava I-NarI片段之完整核17序列,其中含有aspA基因。 |
