胃动素样多肽的制备及表达

摘要

胃动素样多肽、有关的重组DNA及插入了重组DNA的质粒的制备方法。

主权项

1、制备式(1)胃动素样多肽的方法， Phe-Val-Pro-lle-Phr-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Alg-X-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln 式(I) 其中X是除蛋氨酸和天冬氨酸之外的氨基酸残基。 这一方法包括：合成一含有至少6个不带电的极性氨基酸残基，且末端为蛋氨酸的单链DNA、它的互补单链DNA、一编码(1)式氨基酸序列的单链DNA、它的互补单链DNA；用所得的四条单链DNA合成双链DNA，以编码不带电的极性氨基酸残基的DNA片断及其互补片段作为前导序列；在每一所得双链DNA片段的末端加上特异性限制酶的识别位点；用所述限制酶裂解一具有其它蛋白遗传信息的质粒；将上述双链DNA片段接于裂解质粒的每一切点上，以重建一含重组DNA的质粒；用重组质粒转化一微生物；培养所得转化菌株，生产作为嵌合蛋白一部分的、具有(1)式所示氨基酸序列的多肽；将微生物破碎，用溴化氰和肽链内切酶处理嵌合蛋白，以分离式(1)所示多肽；分步纯化多肽。