发明名称 磁性蛋白质共轭体,其制法及其用途
摘要 本发明系关于下式I之磁性蛋白质共轭体□ Ⅰ其中M表示一种带有胺基之可分散磁性反应物质或粒子,P表示一种带有一或多个巯基之蛋白质,及X表示一种藉化学方式连接此两个配位体之有机化学结构;并关于式I蛋白质共轭体之制法,及此类共轭体对于自盐水溶液或体液中移除细胞或可溶性生物有机分子或成分之用途,以及关于其在诊断方法架构中或作为诊断助剂上之用途。附注:本案已向德国申请专利,申请日期:西历1988年3 月10日案号:P
申请公布号 TW130991 申请公布日期 1990.03.21
申请号 TW078100769 申请日期 1989.02.03
申请人 贝林厂股份有限公司 发明人 卡罗德;史费理;伊卡恩;何彼得;杜瑞尔
分类号 C07K3/18;C07K17/06 主分类号 C07K3/18
代理机构 代理人 蔡中曾 台北巿敦化南路一段二四五号八楼
主权项 1﹒式I之磁性蛋白质共扼体 其中M为一种带有胺基之可分散磁性反应 物质或粒子,P为一种带有一或多个巯基 之蛋白质,及X为一种藉化学方式连接此 两个配位体之有机化学结构。 2﹒根据申请专利围范第1项之磁性蛋白质共 轭离,其中X为脂族、芳族、脂环族一脂 族或芳族一脂族问隔基,其可视需要于各 情况中以适当方式被取代。 3﹒根据申请专利范围第2项之磁性蛋白质共 轭体,其中X为-(CH2)n-,其中n=l -8,较佳为n=1-5,且特佳为n= 2或3。 4﹒根据申请专利范围第2项之磁性蛋白质共 轭体,其中X为次苯基,对其两个配位体 而言,可在于其邻位、间位或对位上。 5﹒根据申请专利范围穷2项之磁性蛋白质共 轭体,其中X为次苯基-(CH2)n-,其中 n=1-5,较佳为n=3,其中次苯基 系连接至号琥碗珀醯亚胺基。 6.根据申请专利范围第2项之磁性蛋白质共 轭体,其中X为-CHR-,其中R表示胺 基酸侧链,较佳为丙胺酸、丝胺酸、苏胺 酸或甲硫胺酸等胺基酸之侧链,且特佳为 丙胺酸之侧链。 7﹒根据申请专利范围第2项之磁性蛋白质共 轭体,其中X为亚甲基环己基,其中亚甲 基系连接至琥珀醯亚胺基,且其中关于连 接至环己基环之羧基,较佳系连接于此环 己基环之位置4上。 8.根据申请专利范围第2项之磁性蛋白质共 轭体,其中X为如申请专利范围第4项者 ,但其次苯基环保被甲基、羟基、甲氰基 、乙醯氧基、硝基或氰基、或氯或嗅原子 所取代。 9﹒根据申请专利范围第1项之磁性蛋白质共 轭体,其中蛋白质P之巯基系以自然方式 存在,或藉只硫键结之还原而产生,或藉 化学反应引进。 10﹒根据申请专利范围第1项之磁性蛋白质 共轭体,其中蛋白质P可为一种免疫球蛋 白质或其残基,较佳为一种单株抗体或 Fab、Fab′或F(ab′),片断,一种抗原 或为一种酵素激素、外源凝集素或成长因 子之残基。 11﹒根据申请专利范围第10项之磁性蛋白质 共轭体,其中P表示1gG或lSM类之单株 抗体。 12﹒根据申请专利范围第10项之磁性蛋白质 共体,其中P表示一种单株抗体,其系 用以抵抗一种以已溶解形式存在于盐水溶 液或体液中之抗原。 13﹒根据申请专利范围第10项之磁性蛋白质 共轭体,其中P表示一种单株抗体,其系 用以抵抗在细胞上表现之抗原,尤其是在 髓样系统或淋巴系统之细胞或或周围血液 之细胞上,尤其是在B淋巴球、T淋巴球 或其驱牡物细胞上,或在历瘤细胞上,尤 其是在骨髓之肿瘤细胞上表现之抗原。 14﹒根据申请专利范围第13项之磁性蛋白质 共轭体,其中P表示一种单株抗体,其系 用以抵抗在细菌、类菌质体或原生动物上 表现之抗原或其他在病毒上表现之抗原。 15﹒根据申请专利范围第l项之磁性蛋白质 共轭体,其中P表示一种抗原。 16﹒根据申请专利范围第l项之磁性蛋白质 共轭体,其中M为一种具有金属氧化物核 并具有一常有胺基的被膜外壳之可分散粒 子,让金属氧化物核可包括一组顺磁性物 质。 17﹒根据申请专利范围第16项之磁性蛋白质 共轭体,其中粒子之半径系在约0.1微米 与约1O0微米之问,但较佳系在约0.1微 米与约l.5微米之间。 18﹒根据申请专利范围第1项之磁性蛋白质 共轭体,其中X可藉化学或酵素方法分裂 。 19.式I磁性蛋白质共轭体之制法 其保包括将带有胺基之磁性粒子M与式I 之顺丁烯二醯亚胺基间隔物反应 其保与胺基反应,其中Z为一适当反应性 脱离基,由于形成醣胺链结,而得式Ⅲ化 合物 其最后再与带有新基之蛋白质P反应,而 得式I化合物。 19.一种自盐水溶液或边液移除已溶解之抗 原、抗体、受体、基质、辅因子或碳水化 合物决定之方法,其包括培育此溶液与式 I之适当磁性蛋白质共轭体 于专一性吸附欲移除之成份后,藉磁性方 式移除此磁性蛋白质共轭体,若适当,则 再次自该磁性蛋白质共轭体溶离经专一性 吸附之成份。 21.一种自盐水溶液或体液移除细胞之方法 ,其包括培育此悬浮液与式I之适当磁性 蛋白质共轭体 于专一性吸附欲移除之细胞后,藉磁性方 式移除此磁性蛋白质共轭体,若适当,则 再次自该磁性蛋白质共轭体分离经专一性 吸附之细胞或粒子。
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