A highly specific method for detecting nucleic acids in solution.

摘要

Zum Nachweis von Nukleinsäuren definierter Sequenz durch Hybridisierung mit zwei in gleicher Lösungsphase vorliegenden, zu unterschiedlichen Bereichen der nachzuweisenden Nukleinsäure komplementären, einzelsträngigen Nukleinsäuresonden, wobei die eine Nukleinsäuresonde als Detektorsonde dient und über eine chemische Verbindung mindestens ein Hapten als Markierung gebunden enthält, und die andere Nukleinsäuresonde als Einfangsonde dient und an eine feste Matrix gebunden wird, verwendet man als Hapten ein Steroid, das an mindestens eine Position der Detektorsonde, die nicht an der Wasserstoffbrückenbildung mit der nachzuweisenden Nukleinsäure beteiligt ist, über eine Brücke von mindestens vier Atomen Länge kovalent gebunden ist, inkubiert die in Lösung vorliegende, nachzuweisende Nukleinsäure mit der Detektorsonde und der Einfangsonde in beliebiger Reihenfolge, wobei man die Bindung der Einfangsonde an die Matrix vor, während oder nach der Inkubation mit der nachzuweisenden Nukleinsäure bewirkt, trennt die verbleibende Lösung von dem matrixgebundenen Komplex aus Einfangsonde, nachzuweisender Nukleinsäure und Detektorsonde ab und weist den Komplex über einen seinerseits markierten Anti-Hapten-Antikörper nach.