METHOD FOR DETECTING THE EXPRESSION OF BIOREGULATORY GENES IN MICROCULTURES OF EUKARYOTIC CELLS.

摘要

Méthode permettant de détecter sélectivement avec précision l'expression transitoire de gènes biorégulateurs dans les microcultures de cellules eucaryotes. Cette méthode consiste à a) isoler et cultiver les cellules dans des conditions propres à provoquer l'expression de l'un au moins desdits gènes, b) provoquer la lyse cellulaire avec du chlorhydrate de guanidine, c) précipiter sélectivement l'acide ribonucléique en ajoutant à la préparation de cellules homnogénéisées une solution d'acide de sodium ou de potassium, puis de l'alcool absolu, d) récupérer et éponger l'ARN sur un support matriciel, e) assurer l'hybridation de l'ARN récupéré et épongé à l'aide d'une sonde ribonucléique marquée spécifique de l'un au moins desdits gènes, f) déterminer quantitativement le degré de liaison de la sonde ribonucléique marquée avec l'ARN récupéré sur le support. En soumettant des aliquotes distincts d'un échantillon de cellules à des processus d'induction variables, on peut comprendre quelle est la fonction dynamique exercée par ledit ou lesdits gène(s) dans les cellules.